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一、增菌

1、将1支HB8663a新生霉素加入1袋HBJ8663含225ml志贺氏菌增菌肉汤均质袋中，混匀。

2、以无菌操作取检样25 g（mL），加入装有225 mL志贺氏菌增菌肉汤的均质袋中，用拍击式均质器连续均质1 min～2 min，液体样品振荡混匀即可。

3、放入厌氧培养袋中，加入厌氧产气包于41.5℃±1℃，厌氧培养16 h～20 h。

二、分离

1、操作步骤： 取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36℃±1℃培养20 h～24 h，观察各个平板上生长的菌落形态。

2、结果观察：

  （1）MAC琼脂：无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐

  （2）XLD琼脂：粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐