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大肠埃希氏菌计数(二)复发酵和分离试验


大肠埃希氏菌计数(二)复发酵和分离试验一、复发酵
首先将复发酵试验中,浑浊产气的LST肉汤管逐一编号① ②......
再取两支EC肉汤管,与LST管对应编号① ②......并设置一支空白对照。
注意:若小倒管内有气体,则需先将倒管内的气体排出,再进行接种操作。
之后将LST管振荡混匀,用无菌接种环,分别从每个LST管中取一环菌液,接入对应编号的EC肉汤管中;每换1管,需将接种环灼烧,保证无菌。
接种完毕后将培养箱温度设置为44.5℃,将其放置于培养箱中,培养24-48h。
培养结束后,挑选浑浊产气的EC肉汤管,进行后续的分离操作。
二、分离操作
将浑浊产气的EC肉汤管混匀,取一环菌液,划线至EMB平板(每个EMB平板编号与EC肉汤管编号对应);同时划线标准阳性菌大肠埃埃希氏菌,同步培养作为对照。36℃培养18-24h。
三、结果观察
EMB平板上长出的黑色、有金属光泽的菌落,即为可疑的大肠埃希氏菌。后续可挑取这类菌落进一步纯化、鉴定,以确认是否为大肠埃希氏菌。

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