MUG培养基使用操作视频
操作步骤:
1.取细菌的新鲜培养物,用接种环接种于生理盐水管中,振荡混匀。
2.按照10倍系列稀释法制备菌液,取接种量为10-100cfu的菌悬液,进行试验。
3. 用移液枪吸取100μL稀释好的菌液接种到MUG培养基管中,接种两个平行管,同时吸取100μL生理盐水接种到MUG培养基管中作为空白对照。
4. 相同的方法接种其他菌株,之后放置于30-35℃培养5-24小时。
结果观察:
发现接种大肠埃希氏菌和阴沟肠杆菌的试管变浑浊。而接种金黄色葡萄球菌的试管为澄清状态。
葡萄糖醛酸苷酶检测:
在黑暗环境中,使用366nm紫外灯照射培养后的试管,发现接种两株大肠埃希氏菌的试管均产生蓝白色荧光,这是因为MUG的β-糖醛酸苷键被大肠埃希氏菌产生的葡萄糖醛酸苷酶水解,释放出4-甲基伞形酮,4-甲基伞形酮在紫外灯下可产生蓝白色荧光。
而接种阴沟肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养管无蓝白色荧光,说明这两株菌不能产生葡萄糖醛酸苷酶。
靛基质试验:
向培养后的试管滴加Kovacs靛基质试剂2-3滴,立即观察结果,也可以放置室温5-10min观察结果。发现接种两株大肠埃希氏菌的试管均有红色环产生,这是因为蛋白胨中的色氨酸被大肠埃希氏菌产生的色氨酸酶分解,形成靛基质。靛基质与Kovacs靛基质试剂反应,形成红紫色醌式化合物,即红色环。
而阴沟肠杆菌和金黄色葡萄球菌培养管有黄色环,说明这两株菌均不含有色氨酸酶。