一、试验原理:
用于细菌的木糖发酵试验。
蛋白胨提供基本营养,溴麝香草酚蓝为酸碱指示剂,在酸性条件下显黄色。培养基中的糖类只有木糖,有些细菌含有发酵木糖的酶,可分解木糖产酸,使培养基pH下降,培养基颜色由蓝绿色变为黄色;若不能发酵木糖,则培养基颜色不变。
二、培养基配方(g/L):
蛋白胨 |
10.0 |
氯化钠 |
5.0 |
木糖 |
1.0 |
溴麝香草酚蓝 |
0.024 |
pH 7.4 at 25℃ |
三、试验方法:
1.将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/mL)的菌悬液;吸取0.05mL-0.08mL(约1-2滴)至生化管中,36±1℃培养24-48h后,观察培养基颜色变化。
2.放置于阴暗干燥处,低温保存。
3.用磨砂轮在安瓿瓶颈部划线一圈,掰开待用;将标准储备菌株接种到非选择性肉汤中或采用其他制备方法,制备成5 McFarland浊度(约109CFU/mL)的菌悬液;吸取0.05mL-0.08mL(约1-2滴)至生化管中
4.在36±1℃培养24-48h,观察实验结果。
四、结果观察与解释:
接种以下质控菌株,36±1℃培养24-48h:
质控菌株 |
菌株编号 |
生长情况 |
其他特征 |
单增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
+++ |
阴性,培养基颜色不变 |
英诺克李斯特氏菌 |
ATCC33090 |
+++ |
阴性,培养基颜色不变 |
福氏志贺氏菌 |
ATCC12022 |
+++ |
阴性,培养基颜色不变 |
伊氏李斯特氏菌 |
ATCC19119 |
+++ |
阳性,培养基变黄 |
西尔李斯特氏菌 |
ATCC35967 |
+++ |
阳性,培养基变黄 |
肺炎克雷伯氏菌 |
CMCC(B)46117 |
+++ |
阳性,培养基变黄 |
图1-1木糖生化管质控结果
备注:a:单增李斯特氏菌,b:英诺克李斯特氏菌,c:福氏志贺氏菌,d:伊氏李斯特氏菌,e:西尔李斯特氏菌,f:肺炎克雷伯氏菌,g:空白生化管
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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