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微生物的分离、纯化及培养技术



录入时间:2008-10-20 13:09:13 来源:青岛海博

                          微生物的分离、纯化及培养技术
分离与纯化:从混杂的微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程。
为什么要进行纯培养:平板上的单一菌落并不一定保证是一种菌。
常用的分离、纯化方法:
单细胞挑取法         
稀释涂布平板法
稀释混合平板法     
平板划线法 
稀释涂布平板法 :
原理:
 步骤:  1、倒平板: 牛肉膏蛋白胨培养基,高氏I号培养基,查氏培养基冷却至55-60℃时,混匀后倒平板,牛肉膏蛋白胨培养基倒4皿,高氏I号培养基和查氏培养基各倒3皿。
                2、制备污水稀释液:10g土样,加入90ml无菌水中,在三角瓶中振摇20min。取0.5ml 加入盛有4.5ml无菌水的试管中,以此类推,制成不同稀释度。
                3、涂布:将上述每种培养基平板底面标记稀释度,然后用无菌吸管从最后三种稀释度,即10-4、10-5和10-6的试管中吸取0.1ml对号放入平板上,用玻棒涂布。
                4、培养:高氏I号和查氏倒置培养于28℃培养箱中培养3-5days,牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在37℃培养1-2days。
         5、挑菌落:转至斜面,检查是否一致,保存。 
平板划线法:
    1、倒平板,标记培养基名称,编号和实验日期。
    2、划线方法 
  稀释混合平板法 :
    1、先加菌
    2、倒平板时注意培养基温度
    3、混合均匀
微生物培养技术
1、斜面接种
2、液体培养基接种
3、穿刺接种
4、将已接种的斜面、半固体和液体培养           基放置培养箱中培养
5、将生长好的菌种用牛皮纸包好,置4℃冰箱中保存。

 
   

 

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