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培养基制备方法-2015药典--控制菌检查



录入时间:2014-9-5 11:43:09 来源:银河澳门官网入口

 

1.胰酪大豆胨液体培养基(TSB)、胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)、沙氏葡萄

糖液体培养基(SDB) 照无菌检查法(通则1101)制备。

2、沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)

照无菌检查法(通则1101)制备。如使用含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基,

应确认培养基中所加的抗生素量不影响检品中霉菌和酵母菌的生长。

3、 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA

马铃薯(去皮) 200g           琼脂 14.0g

葡萄糖 20.0g                纯化水 1000mL

取马铃薯,切成小块,加水1000mL,煮沸20-30min,用6-8 层纱布过滤,

取滤液补水至1000ml,调节pH 值使灭菌后在25℃的pH 值为5.6±0.2,加入琼

,加热溶化后, 再加入葡萄糖,摇匀,分装,灭菌。

4.玫瑰红钠琼脂培养基培养基

5.0g         玫瑰红钠 0.0133g

葡萄糖 10.0g    琼脂 14.0g

磷酸二氢钾 1.0g 纯化水 1000ml

硫酸镁 0.5g

除葡萄糖、玫瑰红钠外,取上述成分,混合,微温溶解,加入葡萄糖、玫瑰红钠,

摇匀,分装,灭菌。

5、硫乙醇酸盐流体培养基 照无菌检查法(通则1101)制备

6、肠道菌增菌液体培养基

明胶胰酶水解物 10.0g      二水合磷酸氢二钠 8.0g

牛胆盐 20.0g              亮绿 15mg

葡萄糖 5.0g               纯化水 1000mL

磷酸二氢钾 2.0g

除葡萄糖、亮绿外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值使加热后在25

pH 值为7.2±0.2,加入葡萄糖、亮绿,加热至100 30 分钟,立即冷却。

7、紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基

酵母浸出粉 3.0g       中性红 30mg

明胶胰酶水解物 7.0g   结晶紫 2mg

脱氧胆酸钠 1.5g       琼脂 15.0g

葡萄糖 10.0g          纯化水 1000mL

氯化钠 5.0g

除葡萄糖、中性红、结晶紫、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH

使加热后在25℃的pH 值为7.4±0.2。加入葡萄糖、中性红、结晶紫、琼脂,加

热煮沸(不能在高压灭菌器中加热)。

8、麦康凯液体培养基

明胶胰酶水解物 20.0g      溴甲酚紫 10mg

乳糖 10.0g                纯化水 1000mL

牛胆盐 5.0g

除乳糖、溴甲酚紫外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值使灭菌后在

25℃的pH 值为7.3±0.2,加入乳糖、溴甲酚紫,分装,灭菌。

9、麦康凯琼脂培养基

明胶胰酶水解物 17.0g        中性红 30.0mg

胨(肉或酪蛋白) 3.0g       结晶紫 1mg

乳糖 10.0g                  琼脂 13.5g

脱氧胆酸钠 1.5g             纯化水 1000mL

氯化钠 5.0g

除乳糖、中性红、结晶紫、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH

值使灭菌后在25℃的pH 值为7.1±0.2,加入乳糖、中性红、结晶紫、琼脂,加

热煮沸1 分钟,并不断振摇,分装,灭菌。

10、RV 沙门菌增菌液体培养基

大豆胨 4.5g       六水合氯化镁 29.0g

氯化钠 8.0g       孔雀绿 36mg

磷酸氢二钾 0.4g   纯化水 1000mL

磷酸二氢钾 0.6g

除孔雀绿外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值使灭菌后在25℃的

pH 值为5.2±0.2。加入孔雀绿,分装,灭菌,灭菌温度不能超过115℃。

11、木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基

酵母浸出粉 3.0g        氯化钠 5.0g

L-赖氨酸 5.0g          硫代硫酸钠 6.8g

木糖 3.5g              枸橼酸铁铵 0.8g

乳糖 7.5g              酚红 80mg

蔗糖 7.5g              琼脂 13.5g

脱氧胆酸钠 2.5g 纯化水 1000mL

除三种糖、酚红、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值使加热

后在25℃的pH 值为7.4±0.2,加入三种糖、酚红、琼脂,加热至沸腾,冷至50

倾注平皿(不能在高压灭菌器中加热)。

12.三糖铁琼脂培养基(TSI

20.0g             硫酸亚铁 0.2g

牛肉浸出粉 5.0g      硫代硫酸钠 0.2g

乳糖 10.0g           0.2%酚磺酞指示液 12.5ml

蔗糖 10.0g           琼脂 12.0g

葡萄糖 1.0g          纯化水 1000ml

氯化钠 5.0g

除三种糖、0.2%酚磺酞指示液、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,

pH 值使灭菌后在25℃的pH 值为7.3±0.1,加入琼脂,加热溶化后,再加入

其余各成分,摇匀,分装,灭菌,制成高底层(23cm)短斜面。

13、溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基

明胶胰酶水解物 20.0g     甘油 10mL

氯化镁 1.4g              琼脂 13.6g

硫酸钾 10.0g             溴化十六烷基三甲铵 0.3g

纯化水 1000mL

除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 使灭菌后在25℃的pH

7.4±0.2,加入琼脂,加热煮沸1 分钟,分装,灭菌。

14、甘露醇盐琼脂培养基

胰酪胨 5.0g 氯化钠 75.0g

动物组织胃蛋白酶水解物 5.0g  酚红 25mg

牛肉浸出粉 1.0g             琼脂 15.0g

D-甘露醇 10.0g              纯化水 1000mL

除甘露醇、酚红、琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值使灭

菌后在25℃的pH 值为7.4±0.2,加热并振摇,加入甘露醇、酚红、琼脂,煮沸

1 分钟,分装,灭菌。

15、梭菌增菌培养基培养基

10.0g          盐酸半胱氨酸 0.5g

牛肉浸出粉 10.0g  乙酸钠 3.0g

酵母浸出粉 3.0g   氯化钠 5.0g

可溶性淀粉 1.0g   琼脂 0.5g

葡萄糖 5.0g       纯化水 1000mL

除葡萄糖外,取上述成分,混合,加热煮沸使溶解,并不断搅拌。如需要,

调节pH 值使灭菌后在25℃的pH 值为6.8±0.2。加入葡萄糖,混匀,分装,灭

菌。

16、哥伦比亚琼脂培养基

胰酪胨 10.0g          玉米淀粉 1.0g

肉胃蛋白酶消化物 5.0g 氯化钠 5.0g

心胰酶消化物 3.0g     琼脂 10.015.0g(依凝固力)

酵母浸出粉 5.0g       纯化水 1000mL

除琼脂外,取上述成分,混合,加热煮沸使溶解,并不断搅拌。如需要,调

pH 值使灭菌后在25℃的pH 值为7.3±0.2,加入琼脂,加热溶化,分装,灭

菌。如有必要,灭菌后,冷至4550℃加入相当于20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆

大霉素,混匀,倾注平皿。

17. 念珠菌显色培养基

10.2g      琼脂 15g

氢罂素 0.5g   灭菌水 1000ml

色素 22.0g

除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值使灭菌后在25℃的pH

6.3±0.2。滤过,加入琼脂,加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解,倾注平

皿。

SDA培养基用于白色念珠菌控制菌检查;哥伦毕业用于梭菌控制菌检查;甘露醇氯化钠琼脂培养基用于金葡菌控制菌检查;于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基用于铜绿假单胞菌的控制菌检查;木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基用于沙门氏菌控制菌检查;麦康凯琼脂培养基用于大肠埃希菌控制菌检查;胰酪大豆胨液体用于稀释;若紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基用于耐胆盐革兰阴性菌的控制菌检查。

 

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