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微生物限度检查法——培养基及其制备方法



录入时间:2008-10-20 11:00:26 来源:青岛海博

   
   
   1.营养肉汤培养基                                                       
    胨               10g                 肉浸液          1000ml             
    氯化钠           5g                                                     
    取胨与氯化钠,加入肉浸液内,微温溶解后,调节pH为弱碱性,煮沸,滤清,调节
pH值使灭菌后为7.2±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。                             
   2.营养琼脂培养基                                                       
    照上述营养肉汤培养基的处方及制法,加入15~20g琼脂,调节pH值使灭菌后为7.2
±0.2,分装,115℃灭菌30分钟。 
    3 、虎红琼脂培养基
    胨                    5g      虎红(四氯四碘荧光素)    0.0133g
    葡萄糖               10g      (或0.133%虎红溶液10ml)  
    磷酸二氢钾(KH2PO4)    1g      琼脂                      15~20g
    硫酸镁(MgSO4.7H2O)  0.5g      水                        1000ml
    除葡萄糖、虎红外,取上述成分,混合,加热溶化后,滤过,加入葡萄糖、虎红,
分装,115℃灭菌30分钟。
   4 、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)
    胨           10g      琼脂    15~20g
    酵母浸出粉    5g      水      1000ml
    葡萄糖       20g
    除葡萄糖外,取上述成分,混合,加热融化后,滤过,加入葡萄糖,分装,115℃ 
灭菌15分钟。
    5 、胆盐乳糖培养基(BL)
    胨                     20g    牛胆盐                1.3g
    乳糖                    5g    (或去氧胆酸钠0.25g)
    氯化钠                  5g    水                  100ml
    磷酸氢二钾(K2HPO4)    4.0g
    磷酸二氢钾(KH2PO4)    1.3g
    除乳糖、牛胆盐外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,
煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐,分装,115℃灭菌30分钟。
    6 、曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)
    营养琼脂培养基    100ml     2%曙红溶液              2ml
    20%乳糖溶液    5ml     0.5%亚甲蓝溶液    1.3~1.6ml
    取营养琼脂培养基,加热融化后,冷至60℃,按无菌操作加入灭菌的其它三种溶液,
摇匀,倾注平皿。
   7 、麦康凯琼脂培养基(MaCC)
    胨      20g       1%中性红溶液  2.5ml
    乳糖    10g       琼脂          15~20g    
    牛胆盐   5g       水             1000ml
    氯化钠   5g
    除乳糖、1%中性红溶液、牛胆盐及琼脂外、取上述成分,混合,加热使溶解,调节
pH值使灭菌后为7.2±0.2,加入琼脂,加热融化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,
115℃灭菌30分钟,冷至约60℃,倾注平皿。
    8 、三糖铁琼脂培养基(TSI)
    胨         20g        硫酸亚铁          0.2g
    牛肉浸出粉  5g        硫代硫酸钠        0.2g
    乳糖       10g        0.2%酚红溶液   12.5ml
    蔗糖       10g        琼脂           12~15g
    葡萄糖      1g        水              1000ml
    氯化钠      5g
    除三糖、0.2%酚红溶液、琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭
菌后为7.3±0.1,加入琼脂,加热融化后,滤过,再加入其余成分,摇匀,分装,115℃
灭菌30分钟,制成高底层(2~3cm)短斜面。
    9 、四硫磺酸钠亮绿增菌液(TTB)
    胨      5g                  硫代硫酸钠    30g
    牛胆盐  1g                  水         1000ml
    碳酸钙 10g
    取上述成分,混合,微温使溶解,121℃灭菌20分钟。
    临用前,取上述培养基,每10ml中加入碘溶液(取碘6g与碘化钾5g,溶于20ml水中)
0.2ml和0.1%亮绿溶液0.1ml ,混匀。
   10 、沙门氏、志贺氏菌属琼脂培养基(SS)
    胨            5g        硫代硫酸钠        8.5g
    牛肉浸出粉    5g    1%中性红溶液    2.5ml
    乳糖         10g    0.1%亮绿溶液   0.33ml
    牛胆盐      8.5g    琼脂               20g
    枸橼酚钠    8.5g        水              1000ml
    枸橼酸铁铵    1g        
    除糖、指示剂、琼脂外,取上述成分混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.2 
±0.1,滤过,加入琼脂,加热融化后,121℃灭菌20分钟,再加入其余成分,摇匀,冷
至约60℃,倾注平皿。
    11、胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)
    胨           20g      枸橼酸钠              1g
    牛肉浸出粉    3g      枸橼酸铁铵            1g
    乳糖         10g      1%中性红溶液        3ml
    蔗糖         10g      琼脂             18~20g
    去氧胆酸钠    1g      水                1000ml
    硫代硫酸钠  2.3g
    除糖、1%中性红溶液及琼脂外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后
为7.2±0.1,加入琼脂,加热融化后,再加入其余成分,摇匀,冷至约60℃,倾注平皿。

 

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