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培养基制备的基本方法和注意事项



录入时间:2013-11-6 8:44:55 来源:培养基制备

1、培养基的制备记录 
• 每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等。 
• 记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。 2、培养基成分的称取 
• 培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上面做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。 3、培养基各成份的混合和溶化 
• 指示剂应在调节好pH值后再加入;    煮溶后要补加足水份; • 不能把培养基煮焦,焦化的不能使用。 4、培养基pH的校正 
灭菌后pH值会下降0.1~0.2,在做培养基校正pH值时,应比实际值高0.1~0.2; pH调整后,还应将培养基煮沸。 5、培养基的过滤澄清 
• 液体培养基可用滤纸过滤法  
• 琼脂培养基,可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤 6、培养基的分装 
• 斜面: 1/5管          半固体培养基:1/3管 • 高层斜面:1/4~1/3管   平板:13~15ml 7、培养基的灭菌 
(1)含糖类或明胶的培养基: 113℃灭菌15分钟或115℃灭菌10分钟。 (2)无糖培养基: 121℃灭菌15~20分钟。 
(3)血液、体液和抗生素等以无菌操作技术抽取后再加入冷却至约50℃左右的培养基中。 
(4)琼脂斜面培养基应在灭菌后冷至55℃-60℃时取出,再摆置成适当斜面。 8、培养基的质量测试 
(1)如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。 
(2)将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。 (3)用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基,培养24~48小时,如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。   9、培养基的保存  

(1)基础培养基不能超过两周 
(2)生化试验培养基不宜超过一周, 
(3)选择性或鉴别性培养最好当天使用,倾注的平板培养基不宜超过3天。

 

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