流式细胞术
录入时间:2013-9-22 9:18:07
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流式细胞术（ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ， ＦＣＭ）是采用流式细胞仪对单个细胞或其他生物微粒进行快速定性、定量分析与分选的一门技术。ＦＣＭ可通过荧光染料标记可检测病原菌、毒素和血清抗体，还可在细胞悬液中原位杂交产生荧光检出被病毒感染细胞内的特异性病毒核酸（ＤＮＡ或ＲＮＡ）。流式细胞仪主要由细胞流动室（包括样品管、鞘液管）、激光聚焦区、检测系统、数据处理系统等４部分组成，其工作原理是将被检测对象制备成一定浓度的细胞（微粒）悬液，经荧光染色后放入流式细胞仪的样品管中，细胞在气体的压力下进入鞘液管，在鞘液的约束下，细胞（微粒）排列成单列从流动室的喷嘴高速喷出成为细胞（微粒）液粒，经荧光染色后的细胞经过激光聚焦区时受激光激发，产生散射光和荧光信号，通过一些波长选择通透性滤光片，可以将不同波长的散射光和荧光信号区分而将单个细胞（微粒）液滴分离，并由计算机进行图象及数据处理。现在该技术已经能够检测纯化的ＤＮＡ可达ｐｇ级水平，在１０ｍｉｎ内可以完成数据的收集和分析。Ｃｏｈｅｎ等［３４］用荧光染料ＥＢ和光散射信号在２ｈ内分别在４３个不同来源的临床标本中检测出细菌。Ｔａｐｐ等［３５］使用类似方法对苏云金杆菌产生的毒素进行检验和示踪，结果显示ＦＣＭ比斑点ＥＬＩＳＡ法更敏感、快速。
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