1、目的

 

建立生产过程微生物监测的控制规范，确保生产过程的卫生要求。

 

2、范围

 

生产过程微生物控制的全过程。

 

3、责任者

 

质管部、车间相关人员。

 

4、工作程序：

 

4.1化验室根据生产的需要，建立生产过程微生物的日常监测计划。在监测前一天通知生产负责人。

 

a）包装辅料生菌数控制在≤1.0×104个/g，每半年监测一次。一般安排在5月跟11月进行检测。

 

b）滚揉后生菌数控制在≤7.0×105个/g，每一季度监测一次，一般安排在季度的第一个月。

 

c）员工手生菌数控制在≤1.0×103个/cm2，每半年监测一次，一般安排在4月跟10月进行检测。

 

d）设备生菌数控制在≤1.0×103个/ cm2，每半年监测一次，一般安排在3月跟9月份进行检测。

 

e）工器具的生菌数控制在≤1.0×103个/cm2，每半年监测一次，一般安排在2月跟8月份进行检测。

 

f）空气菌落车间控制在≤50个/皿，每半年监测一次，一般安排在1月跟7月份。

 

4.2将培养皿在121℃湿热灭菌30分钟或者180℃干热灭菌2小时。

 

4.3将灭菌培养基加热熔化，冷至45—60℃，在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15ml，待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于30—35℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用。制备好的肉汤培养基平皿应保存在洁净的普通冰箱内，以2—8℃为宜，且应在2周内用完。

 

4.4测包装辅料生菌数和滚揉后生菌数

 

4.4.1将生产过程中的包装辅料，滚揉后的产品取一定量按GB/T4789.2-2003《菌落总数测定》进行检测。

 

4.5测员工手生菌数、设备生菌数和工器具的生菌数

 

4.5.1先将手、设备和工器具进行消毒。

 

4.5.2用泡过生理盐水的无纺纱布擦洗手、设备和工器具。

 

4.5.3将擦过的纱布泡入放有200ml的灭菌生理盐水中，充分混均，得到一个生理盐水样液。

 

4.5.4生理盐水样液自然沉降后取上清液作菌落计数。

 

4.6空气菌落测试

 

4.6.1根据需要化验员穿戴好的工作服，进入生产区进行测试。

 

4.6.2根据生产区面积大小确定最少采样点数目，在满足最少采样点数目的同时，还宜同时满足最少培养皿数。采样点的布置应力求均匀，避免在某局部区域过于集中，培养皿应布置在有代表性的地方（如关键设备或易受污染的地方）和气流扰动最小的地方。

 

4.6.3培养基表面暴露0.5小时后，收集培养皿，将培养皿倒置于恒温培养箱中，30-35℃培养48小时，每批培养基应有对照试验，每批可选定3只培养皿做对照培养，其中2只培养皿做阳性对照，1只培养皿做阴性对照。

 

4.6.4达到规定的培养时间后，菌落数用肉眼直接计数、标记或在菌落计数器上点计，并用5-10倍放大镜检查，有否遗漏。

 

4.7将测得的数据进行计算，计算公式如下

 

平均菌落数M=M1+M2+… +Mn

 

式中：M1=1号培养皿菌落数

 

M2=2号培养皿菌落数

 

Mn=n号培养皿菌落数

 

n=培养皿总数

 

用平均菌落数判断生产过程中微生物是否符合要求，平均菌数必须低于所选定的评价标准。

 

4.8注意事项

 

4.8.1测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。

 

4.8.2防止人为对样本的污染。

 

4.8.3采样时应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。

 

4.8.4一般采用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，应注意培养皿边缘生长的菌落，并注意菌落与培养基沉淀物的区别。