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疫苗生产用相关培养基介绍(2)



录入时间:2011-5-9 14:25:17 来源:互联网

肉肝胃消化汤培养基使用特点
1、肉肝胃培养基用途
        猪丹毒灭活疫苗
         猪丹毒、猪巴氏杆菌病灭活联苗
        牛副伤寒灭活疫苗
         猪巴氏杆菌病疫苗
         猪丹毒活疫苗
        猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联活疫苗
        仔猪红痢灭活疫苗
 
2、猪丹毒杆菌特点
         猪丹毒菌又称丹毒丝菌
         形态:本菌为革兰氏阳性菌,本菌为直或稍弯曲的细杆菌,两端钝圆,大小0.2~0.4um× 0.8~2.5um。单个存在或呈V形、锥形或者短链排列,容易形成长丝状。
 
3、猪丹毒杆菌培养特点
         培养和生物学特性:本菌为微需氧菌,实验室培养兼性厌氧。pH在6.7~9.2范围内均可生长,最适pH在7.2~7.6,生长温度为35~37℃。
        菌落特点:本菌在普通琼脂及普通肉汤中不生长。在含有葡萄糖、0.1%血球全血及4%健康动物血清的肉肝胃消化汤培养基中生长较好,在含有琼脂平皿上培养,菌落表面湿润、光滑、透明、灰白色、露珠状小菌落。并形成a溶血。
 
4、猪丹毒杆菌类疫苗生产工艺
         生产用种子制备
     一级种子繁殖和鉴定:将冻干菌种用马丁肉汤稀释接种于明胶平板,放置37℃培养1-2天,观察菌落特征,符合标准的5个菌落混合于肉肝胃消化汤培养基中,培养24小时后,作为一级种子。
        生产用种子制备
     二级种子繁殖:取一级种子接种于肉肝胃消化汤培养基中,于37℃培养20~22小时,培养后做纯粹检验,立即置2-8℃保存,使用期不超过3天。
         制苗用菌液制备
   ◆用肉肝胃消化汤为基础培养基
   ◆菌液培养:按培养基总量1-2%接种二级种子液,同时按2~4%加入裂解血球全血, 36-37 ℃培养20-22小时,培养过程中需要振荡2~3次,或者采用增菌培养方式,培养菌液可用高速离心法,将菌液浓缩制成菌悬液,用于配制疫苗。          
 
5、肉肝胃汤培养基技术要求
        培养基pH7.6-7.8,培养基清亮无沉淀
        二级种子菌数应当达到每毫升60亿以上
        

 

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