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致病性(致泻性)大肠埃希氏菌及其检验(上)



录入时间:2011-4-29 9:08:23 来源:食品伙伴网

致病性(致泻性)大肠埃希氏菌及其检验
Examination of diarrheogenic Escherichia coli
•        条件性致病菌(opportunistic pathogen)
•        致病性大肠埃希氏菌 是指能使人、动物(esp.婴儿和幼龄动物)感染及人食物中毒的一群大肠杆菌。
•        致病性大肠埃希氏菌属主要分为五大类:
1、产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)                   2、肠道侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)
3、肠道致病性大肠埃希氏菌(EPEC)                 4、肠道出血性大肠埃希氏菌(EHEC)     O157:H7
5、肠粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)
致病大肠埃希菌种类
菌株
侵袭部位
疾病与症状
致病机制
ETEC
小肠
旅行者腹泻、婴幼儿腹泻、水样便、腹痛等
LT、ST
EPEC
小肠
婴幼儿腹泻、水样便发热、呕吐
病菌黏附、破坏细胞
EIEC
结肠
志贺样腹泻,脓血便
黏附、内毒素破坏细胞
EHEC
结肠
出血性结肠炎等
志贺样毒素(VERO毒素)
EAEC
小肠
婴儿腹泻、水样便、脱水
黏附、毒素
 
•        致病性大肠杆菌与非致病性大肠杆菌在形态、培养特性及生化特性上是不能区别的,只有用血清学方法按抗原性质来区分。致病性大肠埃希氏菌的致病性是一个很复杂的问题,也并非由某一方面的因素所决定。
肠外感染:多为机会感染,表现为泌尿系感染(多见),胆囊炎、腹膜炎等。
肠内感染:由致病大肠埃希菌引起,表现为腹泻。
一、生物学特性
1.形态与染色特性
菌体两端钝圆,中等大小,杆状(有时呈卵圆形);1~3µm X 0.6µm;周生鞭毛,能运动;不产生荚膜,无芽孢;革兰氏阴性。有时两端着色较浓,要与巴氏杆菌区分开来。
2.培养特性
1)需氧及兼性厌氧菌
2)对营养要求不高,在普通琼脂上生长良好,在15~45℃范围内均可生长,最适生长温度37℃,最适pH为7.2~7.4。
3)在普通琼脂平板上可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落。与沙门氏菌菌落较相似,但是,大肠杆菌菌落对光(45角折射)观察可见荧光。
4)在普通肉汤中18~24h均匀浑浊,而后底部出现粘性沉淀物,并伴有臭味。能形成菌膜。
5)部分菌落可出现β溶血。
6)远藤琼脂:带金属光泽的红色菌落
7)S.S琼脂:多不生长,少数生长的细菌,也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落
8)伊红美兰(EMB)琼脂:紫黑色菌落,有的有金属光泽
9)麦康凯琼脂:菌落呈红色
3.生化特性
1)可发酵多种碳水化合物产酸产气,不典型菌株不发酵或迟缓发酵乳糖。2)对蔗糖,卫矛醇、水杨苷发酵结果不一致。3)大多数菌株对赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸有脱羧基作用。4)不产生H2S,不液化明胶,不分解尿素。5)不能在氰化钾培养基上生长,靛基质试验阳性,V-P试验阴性,不利用枸橼酸盐。此为典型的大肠埃希氏菌特性。
IMViC试验: I:吲哚(靛基质)试验,  M:甲基红试验,Vi:V-P试验, C:枸橼酸盐利用试验
典型大肠杆菌IMViC试验为+、+、-、-。如IMViC试验为+、+、-、-,且乳糖发酵,表明被检物已有粪便污染,有发生肠道传染病的危险,这是卫生细菌中常用的检测指标。
 
表5—20  大肠杆菌的主要生化特性
硫化氢
赖氨酸脱羧酶
+/–
尿素酶
鸟氨酸脱羧酶
+/–
靛基质
+
精氨酸双水解酶
(+)/–
MR试验
+
苯丙氨酸脱氨酶
V-P试验
丙二酸盐
水杨苷
d
西蒙氏枸橼酸盐利用
七叶苷
d
葡萄糖
卫矛醇
d
乳糖
+或×
KCN
动力
+/–
阿拉伯糖
+
山梨醇
+
注:+阳性;  -阴性;  d有不同的生化型;  +/-多数阳性,少数阴性; (+)/-多数迟缓阳性,少数阴性;  ×迟缓不规则阳性或阴性
 
4.血清学特性    大肠埃希氏菌的抗原构造主要由菌体抗原(O),鞭毛抗原(H)和荚膜抗原(K)三部分组成。
1)O抗原  每一血清型只含有一种O抗原。本菌已发现有170种O抗原,分别以阿拉伯数字表示。
2)H抗原  一种大肠埃希氏菌只有一种H抗原,无鞭毛则无H抗原。H抗原共有64种。
3)K抗原  又称包膜抗原。共有103种。
•        新分离的大肠埃希氏菌70%具有K抗原。根据耐热性可把K抗原分为A、B、L三类,B抗原与L抗原均可在煮沸后被破坏,A抗原耐热性强,可耐受煮沸1小时而不被破坏。致病性大肠埃希氏菌的抗原主要为B抗原,少数为L抗原。
•        根据O抗原可将大肠埃希氏菌分成若干血清群,再根据K抗原和H抗原进一步分为若干个血清型或亚型。根据大肠埃希氏菌抗原的鉴定结果,写出其抗原式,如O111:K58(B)H12。一般认为H抗原与致病性无关,因此,一般不需要进行H抗原的鉴定。
5.抵抗力   抵抗力中等,各菌型之间存在差异。此菌对青霉素有中等抵抗力,对一般消毒剂都比较敏感。对氯尤为敏感,水中游离氯达到0.2 mg/L时,即可杀死此菌。此菌在土壤中、水中及粪便中可存活数月以上 。
6.毒素特性    有些大肠埃希氏菌产生肠毒素。
1)不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT):化学成分为蛋白质,分子量较大,具有免疫原性。60℃ 30分破坏。可引起肠道分泌增加,出现腹泻。
2)耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin,ST):分子量较小,无抗原性。100℃ 30分钟仍有活性。可引起肠分泌增加。

 

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