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    甘肃金银花中绿原酸含量与抑菌作用的实验考察



    录入时间:2011-1-17 10:01:28 来源:中国论文下载中心

    摘要:目的:考察甘肃金银花的品质。方法:采用高效液相色谱法,测定绿原酸含量;以试管稀释法,考察其体外抑菌作用。结果:通过实验比较,甘肃金银花与流通的正品金银花中的绿原酸含量基本一致,其叶中绿原酸的含量也较高;甘肃金银花有显著的的体外抑菌作用。结论:甘肃金银花绿原酸含量较高,抑菌作用强,有良好开发前景。
      关键词:甘肃金银花;  绿原酸;  体外抑菌
      Research on the Content of Chlorogenic Acid and Antimicrobial Effect of Flos Lonicerae harmsis
      Abstract:Objective:To investigate on the quality of Flos Lonicerae harmsis.Methods:To determine the content of chlorogenic acid by HPLC and observere the antimicrobial effect of Flos Lonicerae harmsis by the method of tube-dilute.Results:The contents of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis and Flos Lonicerae are similar; Flos Lonicerae harmsis has remarkable antimicrobial effect and is stranger than the Flos Lonicerae's.Conclusion:The content of chlorogenic acid in Flos Lonicerae harmsis is higher and it has remarkable antimicrobial effect.It has a good prospect for making use of  local resources.
      Key words:Flos Lonicerae harmsis;  Chlorogenic acid;  In-vitro antimicrobial effect
       
      金银花原名忍冬,为常用中药。具有清热解毒、凉散风热之功效,主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症。应用历史悠久。金银花植物来源复杂,商品药材品种多,《中国药典》2000年版Ⅰ部收载中药材金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera.japonica Thunb.、红腺忍冬L.hypoglauca Miq、山银花L.confusa DC或毛花柱忍冬L. dasystyla Rehd  4种为法定药用金银花正品,而实际使用远不止于此。甘肃金银花,又称盘叶忍冬,为忍冬科植物叶藏花L. harmsii Gracbnl的干燥花蕾,主要分布在甘肃、四川,收载于《甘肃省中药质量标准(试行)》(1991),是甘肃地方习用品,并且为国家考察品种。但有关甘肃金银花的研究,近年来未见相关报道。本文参考相关文献,采用高效液相色谱法测定了绿原酸的含量并结合体外抑菌实验,对甘肃金银花与正品金银花进行了比较考察,以期对甘肃金银花开发利用提供科学依据。
      1  实验仪器和材料
      1.1  药材甘肃金银花,采自甘肃榆中;正品金银花(为忍冬科植物忍冬 L. japonica Thunb. 的干燥花蕾),安徽亳州,国家抽样品种,经我所中药室鉴定,均为当年鲜品。
      1.2  仪器Waers515泵,2478检测器,7725进样阀,Empower色谱工作站。Hypersile ODS2C18色谱柱(4.6 mm×150 mm),大连依利特公司出品。
      1.3  菌种大肠杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌均购自中国药品生物制品检定所;乙型链球菌由甘肃省人民医院临床检验中心提供。
      2  实验方法和结果
      2.1  绿原酸的测定按《中国药典》金银花项下方法[1]测定,以外标法计算含量,绿原酸峰理论塔板数不低于6 000。结果见表1。
      表1  样品绿原酸含量(略)
      
      《中国药典》以绿原酸的含量作为质量评价指标,结果表明甘肃金银花与流通的正品金银花中的绿原酸含量基本一致,且其叶中绿原酸的含量也较高。因此,甘肃金银花是符合药用要求的。
    2.2  体外抑菌作用
      2.2.1  药液的制备取试验药材10 g,加水200 ml,文火煎煮2次,30 min/次,过滤,合并滤液,水浴上浓缩,制成1 g/ml的药液,流通蒸汽灭菌30 min,备用。
      2.2.2  菌液的制备取新鲜培养的菌苔一接种环,接种于营养肉汤中(乙链培养液中需加入0.5 ml白蛋白),35℃培养18 h后,制成105的菌液,备用。
      2.2.3  抑菌实验按试管倍比稀释法[2]倍比稀释成系列浓度,每个小试管中加入1.0 ml药液,然后加入菌液0.1 ml(乙链培养液中需加入0.1 ml白蛋白),35℃培养24 h,观察记录。重复实验两次,结果见表2。
      表2  样品抑菌实验结果(略)
      结果表明,甘肃金银花有显著的的体外抑菌作用,对革兰氏阳性菌的作用强于革兰氏阴性菌,对金黄色葡萄球菌、乙型链球菌的最低抑菌浓度为0.062 5 g/ml;对大肠杆菌、伤寒杆菌的最低抑菌浓度分别为0.5 g/ml和0.25 g/ml。且均强于对照药材。
      3  讨论
      3.1  金银花中主要含挥发油,黄酮类、三萜类及有机酸等化学成分。一般认为,金银花的抗菌有效成分为绿原酸类化合物,绿原酸虽具有广谱的抗细菌、抗病毒作用,但其并非是金银花中唯一的抑菌成分,且因绿原酸于体内能被蛋白质灭活,其抗菌作用并不甚强[3]。实验结果表明,甘肃金银花和正品金银花的绿原酸的含量基本一致,而抑菌作用差别明显。因此,本实验从一方面证明了绿原酸并非是金银花中唯一的抑菌成分,提示其抑菌作用还有其他成分的参与,其抗菌作用的真正情况、有效成分和作用机理还有待进一步地深入研究。同时也说明仅以一种成分作为质量评价指标,不能完全衡量金银花的质量。
    3.2  《中国药典》2000年版Ⅰ部收载中药材金银花为忍冬科植物忍冬L. japonica Thunb.、红腺忍冬L. hypoglauca Miq、山银花 L. confusa DC或毛花柱忍冬 L. dasystyla Rehd  4种为法定药用金银花正品,并以绿原酸的含量作为质量评价衡量指标,而盘叶忍冬为国内可供药用47种忍冬属植物之一[3]。本实验,甘肃金银花花蕾和叶片中绿原酸的含量较高,与正品金银花的含量相当,完全符合药典对金银花的要求(《中国药典》规定绿原酸含量不低于1.5%), 且抑菌作用明显强于对照样品,因此,对甘肃金银花进行全面研究,综合评价,对充分利用开发金银花资源有重要意义。
     
    作者:郭朝晖, 周学清, 蒋生祥  《时珍国医国药》
      参考文献:
      [1]  国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[M].北京:化学工业出版社,2000:177177.
      [2]  李仪奎.中药药理实验方法学[M].上海:上海科学技术出版社,1991:286293.
    [3]  石  钺,石任兵,陆蕴如.我国药用金银花资源、化学成分及药理研究进展[J].中国药学杂志,1999,34(11):724727.

     

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