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沙门氏菌检验(2)



录入时间:2010-9-19 14:44:07 来源:青岛海博

二、结果分析判定及注意事项
  (一)培养特性
沙门氏菌为需氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌,有动力,有周鞭毛(但有无动力的变种),能在普通培养基上生长良好,最适温度为37℃,最适pH为7.2~7.6,在固体培养基上37℃ 24h菌落可呈中等大小,光滑,圆形,湿润,隆起,在液体培养基内生长均匀混浊。
在检品中,沙门氏菌含量较少或食品加工过程中使其受到损伤而处于濒死的状态时,为了能够分离出沙门氏菌,需要选用增菌培养的办法,如冻冷食品和加工食品必须经过前增菌,使检品中的沙门氏菌恢复其活力,对未经加工的和鲜食品,不必进行前增菌,可用选择性增菌培养,使沙门氏菌得以增值,而使大多数的其他细菌受到抑制,再进行分离,可以提高沙门氏菌的检出率。
采用选择性琼脂平板分离沙门氏菌时,经37℃分别培养18~24h(DHL、HE、WS、SS)或40~48h(BS),各个平板上的菌落特征见表3-1。

表3-1 沙门氏菌属各亚属在各种选择性琼脂
平板上的菌落特征
选择性琼脂平板
亚属Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ
亚属Ⅲ(即亚利桑那菌)
亚硫酸铋琼脂
 产硫化氢的菌落为黑色,有金属光泽,棕褐色或灰色,菌落周围培养基可呈黑色或棕色,有些菌株不产生硫化氢,形成灰绿色的菌落,周围培养基不变
黑色有色光泽
dhl琼脂
 无色半透明,产硫化氢菌落中心带黑色或几乎全黑色
 乳糖迟缓阳性或阴性的菌株与亚属Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同;乳糖阳性的菌株为粉红色,中心带黑色
he琼脂 ws琼脂
 蓝绿色或蓝色;多数菌株产硫化氢,菌落中心黑色或几乎全黑色
 乳糖阳性的菌株为黄色,中心黑色或几乎全黑色;乳糖迟缓阳性或阴性的菌株为蓝绿色或蓝色,中心黑色或几乎全黑色
ss琼脂
 无色半透明;产硫化氢菌株,有的菌落中心带黑色,但不如以上培养基明显
 乳糖迟缓阳性或阴性的菌株与亚属Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同;乳糖阳性的菌株为粉红色,中心黑色,但中心无黑色形成时与大肠埃希氏菌不能区别

(二)生化性状


表3-3 肠杆菌科各属生化反应初步鉴别

硫化氢 (h2s)
靛基质
尿素
(ph7.2)
氰化钾
(kcn)
赖氨酸脱
羧酶
判 定 菌 属
+
沙门氏菌属
+
+
沙门氏菌属(少见),爱德华氏菌属
+
+
+
柠檬酸杆菌属,奇异变形杆菌
+
+
+
+
普通变形杆菌




+
沙门氏菌属,埃希氏首属
甲型副伤寒沙门氏菌,埃希氏菌属,志贺氏菌属

+
+


+
埃希氏菌属
埃希氏菌属,志贺氏菌属


+/- +
+
+
+
克雷伯民族各属
阴沟肠杆菌柠檬酸杆菌量
+
+/-
+
莫尔根氏菌量,普罗菲登斯菌属

注:① 三糖铁琼脂底层均应产酸,不产酸者可排除,斜面产酸与产气与否均不限。
  ② KCN和赖氨酸可选用其中一项,但不能判定结果时,仍需补做另一项。
  ③ +表示阳性,-表示阴性,+/-表示多数阳性,少数阴性。
如尿素、KCN和赖氨酸三项中有一项或两项异常者,可按表3-4判定。如生化反应可疑而A~F多价O血清不凝集时,可补做甘露醇和山梨醇,按表3-5判定。必要时可按表3-7进行沙门氏菌属各生化群的鉴别。
表3-4

尿素
(ph7.2)
氰化钾
(kcn)
赖氨酸
判 定 结 果


+

+
- 

+
+
 
甲型副伤寒沙门氏菌(要求血清学鉴定结果)
沙门氏菌Ⅳ或Ⅴ(要求符合本群生化特性)
沙门氏菌个别变种(要求血清学鉴定结果)

表3-5

甘露醇
山梨醇
判 定 结 果
+
+
沙门氏菌属靛基质阳性变种(要求血清学鉴定结果)
爱德华氏菌属

 
表3-6

赖氨酸
鸟氨酸
onpg
水杨苷
棉子糖
动力
判定结果
+


d
+

+
d


+
d



d



d
+


d
沙门氏菌属
志贺氏菌属
宋内氏志贺氏菌
埃希氏菌属

注:① +表示阳性;-表示阴性;d表示有不同反应。
   ② 伤寒沙门氏菌鸟氨酸阴性,甲型副伤寒沙门氏菌赖氨酸阴性,鸡沙门氏菌无动
力。如果未做氰化钾试验时,常需做V-P试验(22~25℃,4d)哈夫尼亚菌属
为阳性。

表3-7

项目
卫矛醇
山梨醇
水杨苷
onpg
丙二酸盐
kcn
+
+



+
+


+

+

+
+

+
+


+
+
+

+

+





 

 

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