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    培养基的一般常用成分(1)



    录入时间:2010-8-26 15:26:06 来源:青岛海博《现代细菌学培养基和生化试验手册》

     

    (一)水

    制备培养基必须使用纯净的,无微量金属,杀菌性和抑菌性化学物质的蒸馏水。注意,以加氯的水进行蒸馏所得的蒸馏水,即使在使用前通过离子交换树脂,也偶含有显著量的游离氯.所以应进行测试,如正联甲苯胺试验显色。测试后,以硫代硫酸钠中和后或进行重复蒸馏后才能使用。

    (二)琼脂

    琼脂俗称洋菜,英文名agar ,为由海藻类(主要足石花菜)提取出来的一种胶体多糖,即半乳聚糖水解后,产生半乳糖及少量五烷糖和有机硫。其化学性质系为一种不带侧链的半乳聚糖甙,含有90%右旋半乳糖和10%左旋半乳糖。在约每10个吡喃半乳糖单位有一个首位或次位的羟基被硫酸脂化。其阴离子脂组(-SO2 -OH )主要是与钙结合,但也有少数是和镁、钠、或钾结合。

    其制造方法,一般是在每年7-9 月收集海中石花菜,洗涤并经晒干后保存。于冬季冰冻开始时,按1:30 比例将干藻放入水中煮沸,然后加入硫酸少许并煮沸5-6 小时。过滤后待冷,用“漏子”推成粗条,再经日晒夜冻2-3 周后,即成条状琼脂。

    除少数菌种外,绝大多数细菌都不能分解琼脂,因而琼脂在培养某中无营养价值,只是在液体培养基中凝结成半固体或固体培养基而已。

    国外商售琼脂一般比较纯净,国内琼脂则含有杂质较多,故在使用前应先用冷水浸泡洗涤后才能使用。

    供细菌培养使用的品质优良的琼脂应具有下列特性:

    ( l )凝固点不超过2 ,通常范围在3438 。

    ( 2 )1L 1.5%琼脂,在蒸汽浴中重新完全溶化,不超过45 分钟。

    ( 3 )在98 能完全溶解子水。

    ( 4 )在45 仍保待足够的液态,以利于试验时的混合均匀。

    ( 5 )与水的结合水平至少在50%以上,以保证完全的溶解性。

    6)含水量不超过原重17%。

    ( 7 )燃烧残余物不超过3 %。

    8)金属最高允许含量,铅0.0005%,铁0.001%,镁0.1%,钙0.2%,钠0.4%,并不得含有抗菌物质。

    ( 9 )透明度:在蒸馏水中加热溶解后,呈微乳白色透明凝块。无混浊沉淀及微粒。

    ( 10 )凝胶强度:即在1.5%琼脂平板1cm2 表面上于20秒钟内使其破坏的最小重量(g)。优良琼脂应在300-400。

    在实际应用中,一般均将琼脂做成按0.5%的差距,递增至3%的生理盐水琼脂平板,然后用接种环或接种针试行划线涂布,以决定该批琼脂实际使用的浓度。

     

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