用于观察菌体上有无鞭毛、鞭毛在菌体上的位置以及鞭毛的数量。在细菌鉴定中，特别是非发酵菌的鉴定中很重要。

    鞭毛染色可以直接从平板上挑选菌落，或从斜面上刮菌苔涂片即可，但必须注意动作尽量轻，以免鞭毛从菌体上脱落。菌落应是

 生长在营养较好的琼脂平板(如血平板、营养琼脂)上的过夜培养物。不可采用有抑制剂的选择性培养基，如中国蓝、麦康凯、SS琼脂等。观察鞭毛时，应耐心寻找整个涂片上的菌细胞，因为并不是涂片上每个细菌细胞上的鞭毛特性及数量都一样，应以鞭毛数量最多的菌细胞为准。

鞭毛染色(改良Ryu法)

A液：    5％石炭酸            10ml

            鞣酸                     2g

            饱和硫酸铝钾液    10ml

B液：  结晶紫酒精饱和液

    应用液：A液10份，B液1份，混合，室温存放。

   1．玻片的处理：要求用新的载玻片。用前须在95％酒精中浸泡24小时以上。用时从酒精中取出，以干净纱布擦干后使用。

   2．在玻片上滴蒸馏水两滴。一张玻片上可同时制2个涂片。

   3．用接种环挑取血平板上菌落少许，将细菌点在玻片上的蒸馏水滴的顶部。一般只需点一下，仅允许极少量细菌进入水滴，不可搅动，以免鞭毛脱落。

    4．玻片置室温自然干燥。

    5．滴加染液于玻片上，染色。

    6．约10～15min后，用蒸馏水缓慢冲去染液。冲洗时应避免使染液表面的金属光泽液膜滞留在玻片上，影响镜检。

    7．玻片自然干燥后，镜检时应从涂片的边缘开始，逐渐移向中心。寻找细菌较少的视野，鞭毛容易观察。细菌密集的地方，鞭毛被菌体挡住，不易观察。

 

 

 

    四、异染颗粒染色

    用于白喉棒状杆菌染色，异染颗粒可明显地被显示出来。

标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特(Albert)法染色来观察异染颗粒。

甲液：                甲苯胺蓝        0.15g

                         孔雀绿           0.2g

                         冰醋酸           1ml

                         95％乙醇        2ml

                         蒸馏水        100ml

将各染料先溶于乙醇，然后加入水与冰醋酸的混合液中，充分混匀。静置24h后过滤备用。

乙液：                碘               2g

                         碘化钾        3g

                         蒸馏水        300ml

先将碘化钾加少许蒸馏水(约2m1)，充分振摇，待完全溶解，再加入碘，使完全溶解后，加蒸馏水至300ml。

    1. 涂片经火焰固定，加甲液，染3～ 5 min。水洗。

    2．滴加乙液，染l min。水洗。

3．干后镜检，菌体呈绿色，异染颗粒呈蓝黑色。

 

用于观察菌体有无荚膜结构，借此鉴定某些菌，如新型隐球菌。

传统的方法是用印度墨汁，但目前国内无售。常规工作可以用墨汁或墨水代替，但应注意颗粒不能太粗，否则影响观察结果。有人用5％黑色素(nigrosin)水溶液做染料，效果较好。

印度墨汁或5％黑色素水溶液。