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四大酵母培养基的配制



录入时间:2010-6-24 16:13:47 来源:青岛海博

一、目的要求
了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。
  学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。
二、基本原理 
麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。 
三、实验材料 
(一)  药品  
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。 
  (二)  仪器  
天平、高压蒸汽灭菌锅。  
  (三)  玻璃器皿  
移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。  
  (四)  其他物品  
药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。
四、实验内容 
(一)  麦芽汁培养基的配制 
1.培养基成分  
新鲜麦芽汁一般为10-15波林。 
2.配制方法   
(1)  用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。   
  (2)  取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。   
  (3)  糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。   
  (4)  用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。   
  (5)  如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。   
  (6)  分装、加塞、包扎。   
  (7)  高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。 
(二)  马铃薯葡萄糖培养基的配制
1.培养基成分  
  马铃薯   20g  
  葡萄糖   2 g  
  琼脂    1.5-2g  
  水     100ml  
  自然pH

  2.配制方法
  (1)  配制20%马铃薯浸汁  取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml。80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。   
  (2)  配制时,按每100 ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。   
  (3)  分装、加塞、包扎。   
  (4)  高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。
 (三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制  
1.培养基成分   
  黄豆芽   10g  
  葡萄糖   5g  
  琼脂    1.5-2g  
  水     100ml  
  自然pH 
 
  2.配制方法
  (1)  称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10%豆芽汁。  
  (2)  配制时,按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,补足失水。   
  (3)  分装、加塞、包扎。   
  (4)  高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。
(四)察氏(czapck)培养基的配制
1.培养基成分  
  蔗糖       3g  
  NaN03     0.3g  
  K2HP0    0.1g  
  KCl        0.05g  
  MgSO4·7H2O     0.05 g  
  FeS0     0.001 g  
  琼脂      1.5-2g  
  蒸馏水     100ml  
  自然pH    
 
  2.配制方法
  (1)  称量及溶化  量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。  
  (2)  定容  候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。  
  (3)  加琼脂  加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。  
  (4)  分装、加塞、包扎。  
  (5)  高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。

 

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