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兔纤维瘤病毒



录入时间:2009-7-13 9:58:55 来源:青岛海博

兔纤维瘤病毒 (Rabbit fibroma virus) 1932年,Shope描述了棉尾兔的一种良性皮下纤维瘤。由其制备无细胞滤液, 接 种棉尾兔和家兔,均可引起人工感染,使其发生同样的纤维瘤。从而证明其为一种病毒, 称为兔纤维瘤病毒,又称Shope纤维瘤病毒(Shope fibroma virus,SFV)。
〖BT4〗1.形态和理化学特性 兔纤维瘤病毒在电子显微镜下与痘苗病毒和粘液瘤病毒相似。超薄切片中的病毒粒 子的大小为230×280nm,呈卵圆形。病毒位于感染细胞胞浆内的核附近,且常呈 团集 状,这就是光学显微镜下见到的Feulgen染色阳性的包涵体。 某些病毒粒子具有一层外 膜,而较成熟的一些病毒粒子则有双层外膜。细胞外的病毒常呈砖形。 纤维瘤病毒160kb基因组中含有124kb末端反向重复序列(TIR)。在55kb末端片段 中, 400bp末端区域中没有大的阅读框架,却有5个不完全相关回文结构。剩下51kb的 序列有7个紧密纵向排列的阅读框架(ORF),其中4个是100个氨基酸以上的大ORF, 分 别为T1、T2、T4和T5,3个小ORF是T3A、T3B、T3C。这7个ORF的转录方向是基因组末端, 在 它们3末端几乎都有相互一致的TTTTTNT序列,这可能与病毒早期基因转录终止信号有关。 在T1~T5 ORF的蛋白质产物中, T4多肽的N末端 与甲型流感病毒的血凝素原有密切关系。证实T4多肽是由兔纤维瘤病毒感染细胞分泌的。 T2蛋白 与胰岛素家族多肽有很大的同源性。T1和T2蛋白的疏水氨基酸靠近它们的N末端分布。O RF T3C有7个纵向排列的6核苷酸ATTGTT重复拷贝和3对对称侧翼序列。回文结构集中在 T3A/B和T2两个区域内。T2 ORF包含5个短序列区域, 它们中每一个都是由1个6bp短回 文结构和1个10~18bp长回文结构组成。T2的回文结构意义还不清楚。依据1个长回文 结构与能够翻译出同源于胰岛素B链蛋白的基因末端重叠推测, 这些回文结构可能起 分割T2蛋白为几个功能亚单位的作用。 SFV基因组中央区域上BamHI“D”片段为131kb大小,与恶性纤维瘤病毒(MRV ) 基因 组中具有很强毒力作用的BamHI“C”片段相对应,含有编码100个氨基酸以上的大阅读框架1 2个,它们的排列顺序与痘苗病毒和恶性兔纤维瘤病毒极为相似。扑拓异构酶基因、mRNA 帽化酶基因都 位于该片段上。 SFV TK基因编码167个氨基酸,与痘苗病毒和天花及猴痘病毒的TK基因有很高同 源性。位于12 kb AvaI-HaeⅢ片段上。 SFV基因组的某些区域与未感染病毒的兔细胞DNA具有同源性。SFV基 因组同源序列位于基 因组两末端区域中。 兔细胞DNA同源序列存在于兔染色体以外,能够独立复制的共价闭合环 状DN A分子之中。 用环己亚胺处置兔细胞能够使该DNA特异性扩增。它编码的一种蛋白质N端的 157个氨基酸,与SFV编码的514个氨基酸蛋白质N末端的157个氨基酸相一致。 SFV基因组T1阅读框架中的早期启动子已经分离鉴定。它是由约28bp组成。在 -18至-1 1位置上,有连续的8个腺嘌呤残基。该T1启动子不仅在SFV发挥早期启动作用, 而且在痘苗病毒也具有相同启动子功能。不同毒株SFV对宿主DNA的合成影响不同 。杀细胞株SFVI在感染2小时后开始抑制宿主DNA合成,而非杀细胞株SFVW感染 10小时后开始抑制宿主DNA合成,而且抑制程度也弱。另外SFV含有相当数量依赖DNA的RNA聚 合酶、ATP酶、活性蛋白激酶。SFVW的pH45外切酶活性比SFVI和痘苗病毒低,几乎没 有pH78内切酶活性。 纤维瘤病毒编码的生长因子具有上皮生长因子(EGF)属性。在新生鼠中促进前齿破出和 眼睑睁开,阻碍毛生长和体重、身长的增加。该病毒还编码一种上皮生长因子反应性抑制剂 ,在感染细胞中分子量为35kDa,能与抗上皮生长因子抗体反应。 它的抑制作用至少有一部 分是通过竞争EGF-EGF受体反应完成的。 兔纤维瘤病毒可在甘油盐水中于低温下长期保存,但对乙醚敏感。磷乙酸对本 病毒有抑制作用。如在病毒接种后24小时内向接种部位注射10mg磷乙酸,可以完全抑制家 兔发生纤维瘤。 兔纤维瘤病毒不能凝集红细胞。
〖BT4〗2.抗原性 兔纤维瘤病毒在抗原性上与粘液瘤病毒、欧洲野兔纤维瘤病毒以及北美灰色松鼠的 纤维瘤病毒有关,特别是与粘液瘤病毒,在交叉补体结合试验和交叉琼脂扩散试验中均 只出现微小差别。且如上述,给兔接种纤维瘤病毒,可以使其产生对粘液瘤病毒的免疫 保护力。 兔纤维瘤病毒可被墨累谷脑炎病毒和西门利克森林脑炎病毒所干扰。
 〖BT4〗3.培养 某些纤维瘤病毒株,例如OA株,可在鸡胚绒毛尿囊膜上增殖,但不产生局部病变。多 数毒株可在来源于兔、豚鼠、大鼠和人的组织培养细胞上生长并引起细胞病变。在兔肾细 胞培养物上出现灶性病变。 实践中经常应用新生仔兔的原代肾和皮肤细胞培养兔纤维瘤病毒。90% 左右的病毒 在25~3小时(37℃)吸附于细胞上。细胞培养物在接毒后4~5天出现1~2mm直径的 蚀斑。将感染培养物接种家兔或仓鼠颊囊,可以引起肿瘤。 兔纤维瘤病毒不能在兔的淋巴细胞中复制。 接种兔纤维瘤病毒于敏感细胞6小时后,感染细胞浆内形成不同的内含物。内含物由内 质网围绕着。10~12小时内质网几乎完全消失,病毒开始形成。病毒抗原遍及胞浆时,病毒 诱导的抗原出现在细胞膜上,并逐渐增加。
〖BT4〗4.病原性 自然感染病例发生1个或几个皮下肿瘤。瘤体坚实而呈球形, 因其不与其它组织牢固 粘连,触摸时可在皮下移动。切片检查时,肿瘤由纺锤样的结缔组织细胞组成,通常不 见炎性或坏死性变化。将肿瘤滤液接种健兔睾丸,可以使其产生同样的肿瘤。 皮下或肌 肉接种也常可以成功,但腹腔和脑内接种无效。 家兔和棉尾兔在接种后都能发生肿瘤。人工感染家兔的肿瘤生长迅速,肿瘤组织在 10~14天不断增大,此后停止生长,并开始消散。在棉尾兔,肿瘤的生长缓慢,但却 经常可以持续好几个月。 纤维瘤病毒可在脑内接种的1日龄乳鼠体内增殖, 但对其它实验动物和家畜没有病 原性。 5.传播 兔纤维瘤病毒不发生动物到动物的传播,也不能由感染母兔经胎盘传给仔兔。但人工接 种却易引起感染,因此人们推测,蚊或其它吸血昆虫的叮咬,可能是本病主要的传播方 式。实验研究亦已取得此种感染方式的直接证据。先让蚤或伊蚊叮咬患纤维瘤的动物, 随后再使其叮咬棉尾兔,可使后者发生典型的纤维瘤。后来进一步证明,蚊( 包括伊蚊 、按蚊和库蚊)可在吸吮感染血液后的几个星期内传播病毒。 病毒几乎全部存在于其 头部。 棉尾兔纤维瘤在10个月内具有感染性,但身体其它部位和血液中极少含有病毒。家 兔纤维瘤中也有感染性病毒。
〖BT4〗6.兔疫 早在1936年, Shope就已发现患纤维瘤后康复的家兔不再发生纤维瘤病毒的再次 感染。有趣的是,这样的家兔也对粘液瘤病毒具有免疫保护力。在用强毒粘液瘤病毒攻 击后,与对照家兔几乎近100%的死亡率相比,纤维瘤康复兔的死亡率仅6%左右。 接种兔纤维瘤病毒于成年兔,在10天以内,随着肿瘤不断增大, 使局部淋巴结肿胀, 淋巴结内 细胞数目增多。特异性细胞介导的淋巴细胞毒作用在接种第10天达到高峰。来自SF V肿瘤兔的细胞毒T细胞仅能杀死感染兔纤维瘤病毒的靶细胞,对未感染或感染痘苗病毒的靶 细胞没有杀伤作用。 这种特异性免疫机制与肿瘤的恢复密切相关。感染兔纤维瘤病毒兔体 内同时存在抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用和NK细胞杀伤作用。兔纤维瘤病毒能够刺激体 内淋巴细胞增生。 接种旋毛虫的兔能产生一定程度的非特异性免疫效应,抵抗兔纤维瘤病 毒复制和它的肿瘤形成效应。 由于兔纤维瘤呈良性经过,尚未见有应用疫苗预防的报道。

 

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