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正粘病毒诊断-血清学试验



录入时间:2009-7-9 13:50:28 来源:青岛海博

正粘病毒诊断-血清学试验
必须同时检测患畜急性期和恢复期双份血清。如果抗体增高4倍以上,即可诊断为流感病毒感染。双份血清应在相同条件下的同次试验中进行,以保证结果的可靠性。
A.补体结合试验〓抗原由国家流感中心或有关生物制品所购取,或应用由感染鸡胚尿囊膜制备甲、乙、丙三型可溶性抗原。病畜血清应先灭活。接种流感灭活疫苗之后,动物血清中的补体结合抗体并不明显增高。
B.血凝抑制试验〓常用于测定动物血清中的抗体水平以及疫苗接种后的抗体效应。应用与当前流行密切相关的已知病毒或疫苗株接种鸡胚,收集尿囊液作为株或亚型抗原。待检血清需用霍乱滤液或过碘酸钾等方法处理,除去非特异性抑制因子。为了消除少数血清标本中可能出现的非特异性血凝因子,还需以鸡红细胞进行吸收。
C.单扩溶血试验〓用于测定动物血清中的HA和NA抗体,但不能测定内膜蛋白抗体和核蛋白抗体。病毒抗原用感染尿囊液,不需浓缩纯化,被检血清也不需处理。
〖BT4〗9. 正粘病毒诊断-免疫预防〖HT5SS〗由于流感病毒,特别是人类流感病毒变异频繁,因此疫苗注射必须具有针对性,亦即必须针对当前的流行株,才能取得良好的免疫效果。世界卫生组织流感监视中心,已在50多个国家中建立了早期警报系统,一旦发现新的突变株,即可迅速鉴定并用其作为种毒,制造疫苗。一般是用感染鸡胚尿囊液制备福尔马林灭活疫苗,供皮下或肌肉接种用。保护力一般可达50%以上。由于接种反应比较严重,近年来正在研制亚单位疫苗,即用去污剂将病毒粒子裂解后,应用层析方法提取HA(包括或不包括NA)作为疫苗。这种疫苗没有感染性,十分安全,但免疫原性较低,必须加入佐剂,才能引起较好的免疫反应。弱毒活疫苗的研制工作,现已取得较好成果。应用鸡胚低温传代减毒的鸡胚尿囊液疫苗或全胚苗等,在人群中大量应用,证明具有一定的免疫效果。选育自然ts-突变株或者应用硫酸二甲酯或5-氟尿嘧啶等人工诱变ts-突变株的工作,也有明显进展。这类ts-突变株一般不能在37℃以上增殖,因此鼻腔接种后,通常只能在上呼吸道的鼻甲部增殖,而不能在呼吸道深部和肺内增殖,更不能进入全身循环。试用于实验动物,可使其耐受强毒毒株的攻击。应用重组技术选育ts-突变株,取得了可喜苗头,例如以ts-缺损株与流行株进行重组,从而育成既有ts-缺损株特性,又有流行株抗原特征的重组型弱毒疫苗株。朱既明等以自然ts-突变株(H3N2)作为母株,与加温灭活的甲2型野毒株进行重组,获得了具有甲2型抗原和甲3型ts-特性的重组株。经各项实验检查、反应性与免疫性观察以及流行病学效果观察,证明安全有效。对于马、猪和禽类流感病毒感染的预防,目前主要应用灭活疫苗,至于以重组技术培育弱毒疫苗株(包括ts-突变株),尚未见有明显成功的例子。目前,还没有流感病毒弱毒疫苗在人类和动物的免疫预防中应用,鉴于现用的灭活疫苗不能提供完全的保护作用和不能提供局部免疫,流感病毒弱毒疫苗的研究又受到重视。但是由于流感病毒抗原变异相当快而复杂,应用传代致弱的传统方式,难以奏效。因而提出了一个新的对策,就是通过基因工程方法,将致弱的供体流感病毒基因,转移到流行株的基因组中。研究表明,流感病毒的HA和NA是主要的免疫原,可诱导良好的免疫保护,因而将HA和NA基因由流行株转移到致弱的供体病毒基因组中,就可产生新拼组的致弱病毒(attenuatedressortantvaccinevirus)用于免疫预防。用于研究这种新型疫苗的有4种致弱甲型流感病毒供体,即传代致弱株、温度敏感株(ts)、冷适应株(ca)和禽甲型流感病毒供体,研究结果表明,后者具有一定的实际应用意义。应用痘苗病毒和禽痘病毒作为载体研制流感病毒基因工程活载体疫苗,也是很有希望的途径,有研究表明,以禽痘病毒作为载体,导入禽流感病毒的HA和NA,产生的重组病毒,免疫鸡可以抵抗禽流感病毒的攻击。

 

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