水生呼肠孤病毒属（Aquareovirus）[HT5K] 同义名：水生动物呼肠孤病毒（Aquatic animal reovirus） 1979年Meyers从美国牡蛎中分离出呼肠孤病毒（1３p２），１９８１年Winto 等从大马哈鱼分离出呼肠孤病毒（CSV），１９８３年 Nagabayashi等从日本牡 蛎中分离出JOV1病毒，１９８７年 Winton等再次从３种鱼类（Notemigonus Crysoleueas ，Oncorhynchus keta 和Ictalurus punctatus ）以及美国牡蛎 中分离出４种呼肠孤病毒。我国学者（１９８3）从草鱼出血病中分离出一株 草鱼出血病病毒，并鉴定为呼肠孤病毒科中的新成员。这些从鱼类及贝类发现的 呼肠孤病毒，它们有一些共性，即病毒外观相似于正呼肠孤病毒，粒子直径７５nm 左右，核心约５０nm。在氯化铯中浮密度１３６g／cm3，能抵抗乙醚和 蛋白酶处理而感染性不受影响。双股ＲＮＡ基因组有１１个节段，分子量为03×103～25×103kDa，总分子量15×103kDa。分３类，即３个L，３个Ｍ，５个Ｓ。有５种主要结构蛋白，分子量３４×103～１３５×103Da。至少还有２种次要的病毒蛋白存在。病毒在胞浆内复制，可能类似于正呼肠孤 病毒复制方式。病毒宿主范围包括变温脊椎动物和无脊椎动物（贝壳类） 。能在鱼类细胞系中有效增殖，在某些鱼类细胞上能形成蚀斑或合胞体。病毒呈水平传播， 尚未发现任何生物传播媒介。鉴于上述特点，它们不同于已知呼肠孤病毒科中任何一属，曾建议提名为水生 动物呼肠孤病毒属（Aquatic animal reovirus），现正式归为一属。该属代表 种金体美鳊鱼病毒（Golden shiner virus ）。此外，还包括１３p２呼肠 孤病毒、大马哈鱼呼肠孤病毒（Chum salmon virus ）、鲇鱼呼肠孤病 毒（Channel catfish reovirus ）。还可能包括有鲤属鱼呼肠孤病毒（Tench reovirus）、圆鳍雅罗鱼呼肠孤病毒（ Chub reovirus ）、银大马哈鱼呼肠孤病毒（Coho salmon reovirus）、文蛤呼肠孤病毒（ Hard clam reovirus ）、草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus ）即草鱼出血病病毒、大菱鱼呼肠孤病毒（Turbot reovirus）。属中除草鱼呼肠孤病毒（草鱼出血病病毒）外，其它均无重要的致病意义。[BT(3+1]草鱼出血病病毒（Grass carp hemorrhage virus） [HT5K] 同义名：草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus），鱼呼肠孤病毒。 [HT]草鱼出血病主要危害10cm 左右的当年草鱼（４～５月龄），死亡率可达７０％ ，二龄草鱼也易感，成年草鱼则为无症状感染。感染鱼游泳异常，继而离群 独处，或漂游水面，或沉卧池底，或剧转打圈，多在出现上述症状后一天内死 亡。病死鱼体色深暗，眼球突出，全身出血、充血。临床表现通常可分三型：即以肌肉充血 为主的“红肌肉型”；以鳍基及鳃瓣充血为主的“红鳍红鳃型”；以肠道严重 出血为主要特征的“肠炎型”。以上三型往往混合出现。本病是我国最主要的鱼病之一，遍及我国南方各省，当水温超过２０℃时广为流行，一般多在５～９月，８～９月为高 峰，造成严重的经济损失。最早于１９７０年在湖北发现，起先怀疑其病原为 气单胞菌，后来证实为病毒，曾有疱疹病毒之说，１９８３年确定为呼肠孤病 毒，现定名为草鱼出血病病毒（Grass carp hemorrhage virus，GCHV）。我国 科技工作者经过十余年的不懈努力，在病原、诊断和免疫预防方面做了大量 的工作，令人瞩目。19８８年以来，从江浙等地以出血症为特征的草鱼中还分离到另一种不同于呼肠 孤病毒的类似小RNA病毒的病毒。

 

[BT4]1. 形态和理化学特性草鱼出血病病毒直径６５～７０nm，双层衣壳，外衣壳厚约９nm,内衣壳52nm。超 薄切片可见病毒粒子在胞浆中呈晶格状排状。基因组为双股ＲＮＡ，分11个节 段，总分子量约15×103kDa；聚丙烯酰胺凝胶电泳图型为3∶3∶3∶2，可因 毒株不同有所差异，分子量在03×103～31×103kDa。有５种主要结构多肽，分子 量32×103～137×103Da。蔗糖浮密度130g/cm3，氯化铯浮密度137g/cm3 。病毒对酸（pH3）、碱（pH10）及热（56℃，３０min）均稳定，对氯仿和乙醚 不敏感。组织中的病毒在-２０℃保存两年仍有活力。未发现有血凝活性。

 

[BT4]2. 抗原性草鱼出血病病毒与其它已知国外分离的鱼类呼肠孤病毒，如大马哈鱼呼肠孤病毒 、金体美鳊鱼病毒等无抗原性交叉。至于毒株间是否存在着抗原性差异尚待研 究，用特定毒株制备的疫苗对不同地区的免疫效果可有差异，提示可能存在着 不同的血清型。毒株血清型与电泳型之间的关系及其在流行病学上的意义同样有 待阐明。

 

[BT4]3. 病原性草鱼出血病病毒除感染草鱼外，尚能人工感染青鱼及穗鱼，从自然发病的青鱼 中分离到的病毒与本病毒有很强的交叉反应。鲢、鳙、鲤可成为病毒的携带者 ，成熟的草鱼卵也可带毒。人工感染在水温２５～２８℃时，潜伏期７～１０天。浸泡感染也有很高的发病 率，表明鳃可能是病毒的入侵门户。被污染的水可传播本病毒。

 [BT4]4. 培养草鱼出血病病毒能在草鱼细胞系中增殖，最适温度２５～２８℃，常用的有草鱼 吻端组织细胞系ＺＣ７９０１、草鱼肾细胞株ＣＩＫ及草鱼胚胎细胞系Ｃ Ｐ８０等。在ＺＣ７９０１细胞上可产生细胞病变，特点为细胞圆缩、脱 落，在此细胞上传至２２代，产生细胞病变的时间缩短，为３～６天，而对草 鱼的致病性不变。ＣＩＫ细胞的适应毒株２８℃ ２４小时可产生蚀斑，直径小于 １ｍｍ，培养４８～７２小时后空斑增大至２ｍｍ。有的毒株不产生明显的细胞 病变，只能凭借荧光抗体或其它手段检测。在非鲤科鱼类细胞未见有增殖的报 道。

[BT4]5. 免疫除用有机碘等消毒剂处理带毒鱼卵及被污染鱼塘等措施外，还可采用免疫接 种法控制本病。 生产实践中应用多年的组织灭活疫苗行之有效。近年来已研制了细胞培养灭活疫苗，并采用 大转瓶培养及微载体培养新工艺。在免疫途径方面采用尼龙袋充氧浸泡免疫， 均是值得注意的可喜进展。采用标准化的方法筛选毒株并工厂化生产疫苗是 今后的研究方向。

[BT4]6. 诊断根据流行病学及症状可作出初步诊断，但确诊有赖于病原分离与鉴定。

（1）病原分离 采取病鱼血、肝、肾等组织作分离材料。病料应尽可能新鲜 ，否则影响检测结果。分离病毒可试用ＺＣ７９０１、ＣＩ Ｋ等草鱼细胞系，置２８℃培养，观察至少一周，如无细胞病变、蚀斑产生 ，应继续盲传。必要时可用荧光抗体或电镜技术检测。由于分离病毒花费时间长， 再加上分离病毒较不易成功，因此不适于作常规诊断手段。

（2）免疫学检测 使用较广泛。目前已报道的检测病毒方法有荧光抗体检 测、ＥＬＩＳＡ试验及葡 萄球菌Ａ蛋白协同凝集试验。荧光抗体法可用于检测细胞培养或病鱼组织 冰冻切片中的病毒，双抗体夹心ＥLＩＳＡ的应用更为广泛，可检测病鱼组织 悬液或细胞培养冻融液的上清液里的病毒。葡萄球菌Ａ蛋白协同凝集试验是用兔抗 草鱼出血病病毒高免血清致敏的Ａ蛋白，再滴加待检材料，混匀，置室温下３ 分钟后即可观察，出现凝集者为阳性。据介绍病肝的检出率最高。此外还可采用ＰＡＧＥ、电镜等手段诊断草鱼出血病病毒。抗体检测目前在我国尚未普遍开展。