蓝舌病病毒

[BT4]1. 形态特征核衣壳的直径为53～60nm，但因衣壳外面还有一个细绒毛状外层，使病毒粒子 的总直径提高到70～80nm。病毒粒子在氯化铯中离心沉淀以后，绒毛层消失， 原因不明。于电子显微镜下仔细观察，可见绒毛层中的绒毛似乎是由衣壳壳粒 上延伸出来的。成熟的病毒粒子经常包围于一个外层囊膜样结构中。这种囊膜 样结构可被醚或吐温80除去，但病毒活性不受影响。因此人们认为，它们并非 蓝舌病病毒必要的组成成分，而是由细胞膜“抢来”的细胞性物质，故又称为 “假囊膜”。[HT5”SS][JZ]图19-2 蓝舌病病毒（横杠=100nm）[CD2]自Smale等[HT]蓝舌病病毒的衣壳由32个大型壳粒组成。壳粒直径为8～11nm，呈中空的短圆柱 状。[BT4]2. 理化学特性蓝舌病病毒含有20%的RNA，由10个片段的双股RNA组成。RNA的分子量为118×103kDa 。在吖啶橙着染感染细胞时，特别是在感染后期，常可发现橘红色的包涵体， 说明除双股RNA外，还有部分单股RNA的存在。G+C含量为43%。蓝舌病病毒含有7种结构多肽，包括4种主要多肽和3种次要多肽，组成外壳的Vp2 和Vp5由RNA第2及第5节段编码，内壳Vp1、Vp3、Vp4及Vp6 由RNA第1、3、4、9节段编码，核衣壳内Vp7由RNA第7节段编码。 [FQ(11。20,Y-WZ][HT5”H][JZ]表19-2 蓝舌病病毒血清型分布[HT6SS][HJ*2][BG(!][BHDFG2,WK8,K13ZQW]地 区[][JZ]血 清 型[BHDG12]南非和西部非洲中 东伊比利亚半岛美 国澳大利亚南美(巴西)中 国[]1～15，18，19，22，241，3，4，10，12，16102，10，11，13，17，241，20，21，23410[BG)F][HT][HJ][FQ)]蓝舌病病毒可在干燥的感染血清或血液中长期存活，甚至长达25年。也可长期 存活于腐败血液或含抗凝剂的血液中。对乙醚、氯仿和01%去氧胆酸钠有一定 抵抗力，但3%福尔马林和70%酒精能使其灭活，这是蓝舌病病毒与呼肠孤病毒的 明显区别。在病毒培养液中加入蛋白质，例如血清、白蛋白以及蛋白胨等，可 以明显提高其存活率。将感染血液或含毒组织乳剂混于等量的草酸盐石炭酸 甘油缓冲液[ZW(]即OC.G.溶液，其配方是：水500ml，甘油500ml，草酸钾5g， 石炭酸5g。[ZW)]内，置于4℃冰箱保存，蓝舌病病毒至少可以存活半年以上。60 ℃加热30分钟以上灭活，75～95℃使之迅速灭活。蓝舌病毒株具有血凝素，位于病毒粒子最外层的Vp2与血凝活性有关，可凝 集绵羊及人O型红细胞。血凝特性不受pH、温度、缓冲系统和红细胞种类的影响 。血凝抑制试验具有型特异性。蓝舌病病毒是高效的干扰素诱生剂，据Jameson等（1978）报道，给小鼠静脉注 射蓝舌病病毒，8小时后测定其血浆中的干扰素，每ml高达60万单位，是迄今比 任何其它病毒性或非病毒性诱导剂都高5～10倍的干扰素诱生剂。

[BT4]3. 抗原性应用细胞培养或敏感实验动物进行中和试验和RNA杂交试验，已经证明蓝舌病病 毒至少有24个血清型。Vp7是群特异性抗原，可用补结、琼扩或荧光抗体检 测，Vp2是型特异性抗原。蓝舌病病毒血清型在世界不同地区的分布见表19-2。

[BT4]4. 培养蓝舌病病毒易在6日龄鸡胚的卵黄囊内生长，但鸡胚在接种病毒后，应将孵育温 度降至335℃。分离样品最好来自临床早期或发热期的血样品，尤其用淋巴细 胞较好。绒毛尿囊膜接种也可引起感染。鸡胚通常在接种后36～72小时病毒即 达最高滴度，因毒株而异，含毒量可在10575～1080EID50。已 发现个别对鸡胚不敏感的毒株。病毒经鸡胚传代，毒力迅速减弱，而免疫原性 不变。鸡胚在接种后4～8天死亡，胚体广泛出血。10～11日龄鸡胚静脉内接种的敏感性最高 ，至少比卵黄囊接种 敏感100倍。蓝舌病病毒初次分离株在细胞培养上不敏感，能适应在羊胚肾细胞或肺细胞、 牛肾细胞、仓鼠肾原代细胞和继代细胞（BHK21）、Vero细胞、鸡胚原代细胞 以及L细胞等细胞培养物中增殖，并产生蚀斑或细胞病变。一般在1～3天内开始 出现细胞病变，最后整个细胞单层变性脱落。此外，也可用人的某些细胞系， 如张氏肺细胞、HeLa细胞、羊膜细胞等。蓝舌病病毒在L细胞内的隐蔽期约4～5 小时。于接种后12小时，细胞培养物内即有高价病毒，宿主细胞的蛋白质合成 发生严重障碍。也已报道蓝舌病病毒可在组织培养的库蠓唾液腺细胞内增殖。 蓝舌病病毒不能在猪、犬和猫等动物的肾细胞培养物内增殖。蓝舌病病毒借细胞胞饮作用进入细胞内，并在细胞胞浆内增殖。病毒粒子中的 转录酶在衣壳外绒毛状层脱落时活化，在Mg的存在条件下，由10个基因 组节段分别转录出10种mRNA，同时及随后发生RNA的复制和蛋白质的译制。此时 ，细胞内质网肿胀，并出现胞浆内包涵体和由微丝或微管组成的斑块。成熟病 毒在细胞膜或胞浆空泡膜上出芽，并且由此获得一层细胞源性膜——假囊膜。放 线菌素D、丝裂霉素C不能抑制病毒的复制。

[BT4]5. 病原性蓝舌病病毒主要感染绵羊，特别是羔羊。潜伏期约一周。病羊发热，高达42℃ ，精神沉郁，食欲丧失，随后出现口鼻部典型的“蓝舌”病变。在发热后5～7 天检查口腔，可见粘膜上有多数糜烂，并常因胃肠道发生病变而出现血样下痢 。头、耳和颔间组织和喉部经常发生水肿，并常因蹄部知觉层发生病变而出现 跛行。病羊被毛断裂，甚至全部被毛脱落。急性期的死亡率为20%～30%，该病的 严重性依据病毒毒株、绵羊品种和局部生态学条件而不同。在非洲和欧洲的某 些严重暴发中，死亡率有时高达99%。但在美国，死亡率一般不超过1%～7%。美 利奴品种的绵羊，特别是其羔羊，似乎对本病最为敏感，病死率在70%以上。蓝舌病病毒可经胎盘感染胎儿，引起流产、死胎或 胎儿先天性异常，严重时甚 至可使整个羊群丧失一个产羔期的全部羔羊。Bwangamoi给57头母羊接 种强毒力的蓝舌病病毒均在其妊娠第35～42天之间发现病毒于接种后6～7天侵 入胎儿，10～12天后胎儿死亡。病理组织学检查证明蓝舌病病毒在肝上皮细胞 和血管上皮细胞复制，成年绵羊毒血症有时超过28天。病毒在牛体存在的时间 还要长，但仅当公牛发生病毒血症时，能从公牛精液中分离到病毒，并经交配 传播给母牛和犊牛。用含病毒的血液、血清或磨碎组织给绵羊接种，很易引起人工感染。Pini用10型蓝舌 病病毒给绵羊作耳部皮下接种，随后每天扑杀1头，检查组织中的 病毒量，共11天。平均潜伏期为69天，最初的临床症状为发热。于接种后第4 天，可在头部淋巴结、扁桃体和脾脏中发现病毒，于接种后第6天出现病毒血症 ，于接种后第8天出现肉眼病变，该作者认为，病毒最先在局部淋巴结内增殖，随 后经淋巴或血流到达其它部位的淋巴组织，再行增殖，最后散布至全身各器官 和组织。蓝舌病病毒几乎感染所有的反刍兽，包括家养和野生的，牛和山羊和某些野生 动物（尤其是北美的白尾鹿）也可严重发病，症状和病变与绵羊相似。通常只 有2%～10%的牛感染后有临床症状，且大多比较缓和，可能发生长期持续的病毒 血症。病变包括肺充血以及肌肉和结缔组织的出血和水肿，口和蹄部也可能有 病变。心肌、骨骼肌出现弥漫性混浊肿胀和灶状变性，但组织学检查不易发现 包涵体。Luedke报道，用6株蓝舌病病毒分别注射6组18头乳用山羊， 每头皮内和皮下接种蓝舌病病羊的抗凝血液4ml，结果18头山羊全部感染，并均 由其血液中分离到病毒。蓝舌病病毒可能使猪发生蹄部病变。脑内接种时，蓝舌病病毒可以适应于1～4日龄乳鼠和乳仓鼠，适应株病毒在脑 内的滴度较高，可用其制造补体结合试验的抗原。日龄较大者则不易感，多数 耐过不死。风可能传播本病毒，造成远距离扩散。据兽医公报（１９83），北非带毒的库 蠓传到西班牙和葡萄牙，使绵羊发生了较大流行。