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龙牙蕉组织培养技术二



录入时间:2009-7-1 16:19:21 来源:青岛海博

3 结果与分析
3.1
起始培养
外植体接种4d 后,叶鞘萌动,1 周后开始转绿,外植体随之膨大,30d 左右在叶鞘基部长出不定芽。从表1 可以看出,添加AD 能促进不定芽的分化,添加量以20 mg / L 为好,不但繁殖倍数较高,而且不定芽生长粗壮,40 mg / L AD 虽然能获得较高的繁殖倍数,但芽稍小。而不添加AD 的外植体极少分化出不定芽,在没有添加AD 的培养基上,叶鞘抽出较迟,外植体只管膨大,后期茎尖抽出之后则保持旺盛的直立生长,有的要2 、3 个培养周期才能长出不定芽。

在将外植体进行切分的试验中,从表2 可以看出,将外植茎尖切分为二等分的诱芽率最高,切分为四等分的因为切口褐变影响成活而致使诱芽率最低。

3.2 继代培养
从表3 可以看出,细胞分裂素以添加6-BA 为好,繁殖率远高于KT ; 6-BA 6 mg / L 的组合虽然繁殖倍数最高,但小芽和无效芽较多,芽眼膨大,而且产生较多愈伤组织;而6-BA 4 mg / L 的组合表现最好,不但有较高的繁殖倍数,而且不定芽生长粗壮,基部愈伤组织很少,不会防碍芽的生长。随着培养代数的增加,6-BA 的浓度要适当调低,一般以添加3mg / L 为好。

3.3 生根培养
将不定芽切割接种于1 / 2 MS + NAA 0.5 mg / L + AC 1 mg / L 的培养基上进行生根培养,4 6d 后开始长根,培养约3 周即可长成具有两片展开叶、2 ~ 3 条根的完整小苗。炼苗2 ? 3d 后便可移栽。为了增加育苗量,节省成本,可以采用袋培。
3.4
小苗移栽
试验表明,组培小苗移栽成活率94%。根长3 ~ 4 Cm ,有两片真叶的小苗移栽最容易成活,且生长更茁壮。当小苗长成具有5 ~6 片完全展开叶时便可出圃种植。
假植苗有变异,变异类型有畸形和花叶两种,多数变异可修复,变异苗在苗期容易识别,可在育苗期检查除去。大田种植未发现变异株。
4
讨论
虽然较高的细胞分裂素水平(6-BA )能获得较高的增殖率,但产生的变异株增加,因此生产上要根据丛芽的生长状况适当调整6-BA 的水平,当繁殖倍数较高时,可以适当调低6-BA 的用量。我们在生产过程中,6-BA 一般采用3 mg / L 。在起始培养基中添加AD 能促进叶鞘的抽生,进而产生不定芽,培养基中没有添加AD 的情况可以通过将茎尖切分为二来破坏其顶端优势,促进不定芽的分化。

 

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