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病毒病的免疫预防-新型可复制型疫苗



录入时间:2009-6-19 13:51:24 来源:青岛海博

 

早在70年 代末,人们就证实了动物体内的细胞具有摄取裸露DNA分子的能力。80年代中期,利用克隆 的目的基因, 通过体内直接转染的方法大量用于基因治疗途径的研究。1992年Tang等人研究 发 现,给小鼠耳部皮肤接种人生长激素质粒后,大部分小鼠产生了抗人生长激素的抗体,再次 接种质粒后,可获得再次免疫应答,从而提出了基因免疫(Genetic Immunization)的概念。 随后在不同杂志上相继出 现了DNA或核酸疫苗这一专门术语。1994年5月,世界卫生组织(全球疫苗及免疫计划署)在日 内 瓦召开了有关核酸疫苗的会议, 对这一技术进行了初步评价并讨论了其在发展中国家对一 些重要疾病的潜在应用价值。 近几年,基因免疫在病毒免疫研究中得到广泛应用,DNA疫苗 就 是指那些注入动物体内后能够诱导机体产生免疫反应的病毒保护性抗原基因表达质粒。由 于注入机体 内的DNA疫苗是病毒抗原的表达质粒,因此,构建DNA疫苗必须符合下列要求: 病毒蛋白基 因具有正确的读码框架,在病毒基因上游具有可被哺乳动物细胞识别的启动子序列、 增强 子序 列,具有适当的终止信号。这种病毒结构蛋白的表达质粒通常只带有大肠杆菌的复制起始点 ,不能在哺乳动物细胞内复制。DNA疫苗既可以是裸DNA分子,也可以是复合DNA分子,如D NA包装在脂质体内,或与磷酸钙形成共沉复合物,或与某种蛋白质(能被特异组织细胞内 吞的 蛋白质)偶联在一起。DNA疫苗接种的方式有两种,一种是直接注射法,可以将质粒直接注 入骨骼肌组 织、皮下、静脉、腹膜内或鼻粘膜内等,其中以肌肉和鼻粘膜注射效果最好。人们研究发现 ,肌细胞具有易被DNA转染的特点,而鼻粘膜则含有丰富的粘膜相关的淋巴细胞, 具有良好 的提呈抗原的特性。另一种是微粒轰击(particle bambardment)技术, 将DNA涂布于微金颗 粒上,通过基因枪将DNA分子射入皮肤细 胞内。皮肤属于免疫优势器官,含有可以激发体液免疫和细胞毒性T淋巴细胞免疫反应的多 种免疫成分,因此,一旦接触少量抗原就可产生有效的免疫保护反应。DNA疫苗的研究刚 刚开始, 目前已经试验研究的病毒性DNA疫苗包括:人免疫缺陷病毒 (HIV) env 基因、乙 肝病毒表面 抗原(HBsAg)基因、甲型流感病毒核蛋白(NP)基因、禽流感病毒血凝素基因、牛疱疹病毒 糖 蛋白(gpⅠ、Ⅱ、Ⅲ)基因、狂犬病病毒糖蛋白基因等。DNA作为疫苗的研究虽然只是近几 年的事,但与以蛋白质作为疫苗相比,DNA疫苗具有如下特点: DNA 疫苗既可以诱导体液免疫,也可以诱导细胞免疫;因为DNA疫苗中不含有非特异 性抗原编码基因, 特异性强; DNA疫苗可以在宿主体内持久表达。但是在今后研究和使用D NA疫苗时,下列因素也必需加以考 虑。①由于人们在自身免疫病(如全身红斑狼疮)中曾经发现了抗DNA(与一定载体 蛋白相连的DNA)抗体,那么在接种DNA疫苗后是否亦有可能产生这类抗体?② DNA的持久性表 达, 从理 论上讲,有可能导致免疫耐受、自身免疫、过敏反应和超免疫性等副作用的产生;③尽管 目前对DNA 疫苗的研究发现,DNA在注入体内后不发生复制等现象,但是高浓度外源性DNA对细胞的转化 可 能会导致活动癌基因的插入、宿主原癌基因插入活化、抑制基因的插入失活等。总之, DNA疫苗 虽然具有良好的研究前景,但是关于DNA疫苗的实际应用价值尚需进一步阐明。

 

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