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理化学因子对病毒的作用-病毒的保存



录入时间:2009-6-16 14:14:14 来源:青岛海博

短期保存病毒,可直接或悬浮于50%甘油盐水中,置-30℃冰箱中保存。长期保存病毒,一般应用下述两种方法:[BT4]1.快速低温冰冻于病毒悬液内加入灭活的动物血清或其它蛋白保护剂,最好再加一些二甲基亚砜(例如5%~10%),并迅速冷冻和保存于-70℃或-196℃。含病毒的组织材料可以直接低温冰冻保存;如先浸入50%甘油缓冲盐水中,再行低温保存,效果更好。〖BT4〗2.冷冻干燥在真空条件下使冰冻的病毒悬液脱水。通常是用低温脱水法,并以干燥剂或冷凝法除去冷凝器内尚未凝结的多余水汽。常用的干燥剂有五氧化二磷、硫酸钙、氯化钙和硅胶等。冷冻干燥毒种时,一般应用脱脂牛乳、灭活的正常动物血清、饱和蔗糖溶液等作为保护剂。真空干燥时,将病毒悬液与5~10倍量的保护剂混合,分装安瓶,每支02~05ml,立即放入事先预冷的-30~-40℃酒精 中冻结1~2小时,随后迅速置于盛有干燥剂的干燥器内,立即抽气干燥。充分干燥后,打开干燥器取出干燥毒种安瓶,再行抽气使其真空,并在火焰上熔封安瓶口。这样的冻干毒种一般可在4℃冰箱内保存几年到十年以上。某些类型的冻干机采用低温凝结干燥法, 是使冻干材料中的水汽通过低温冷凝器,凝结成冰,逐渐脱水干燥。现代冻干机具有冷冻、干燥和抽真空等操作的全套装置,使用十分方便。

 

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