A7　溶菌酶营养肉汤　　　　
牛肉膏　　　　　　　　　　　3.0g　　　　
蛋白胨　　　　　　　　　　　5.0g　　　　
蒸馏水　　　　　　　　　　　稀释至1000mL       
0.1%溶菌酶溶液 10.0mL　　　　pH6.8±0.1　
　将上述成分(溶菌酶溶液除外)溶解于蒸馏水并稀释至1000mL。校正pH后,分装于烧瓶中,每瓶99mL。121℃高压灭菌15min。于每瓶中加入0.1％溶菌酶溶液1mL,混匀后分装灭菌试管,每管2.5mL。　
　注：溶菌酶溶液：在65mL灭菌的0.1mol/L盐酸中加0.1g溶菌酶。煮沸20min溶解后,再用灭菌的0.1mol/L 盐酸稀释至100mL。
A8　改良 V-P培养基　　　　
(月示)蛋白胨　　　　　　　　 7.0g　　　  
葡萄糖　　　　　　　　　　　 5.0g　　　　
氯化钠　　　　　　　　　　　 5.0g　　　　pH6.5±0.1　
　将上述各成分溶解于蒸馏水并稀释至1000 mL。校正pH后分装试管,每管5mL。121℃高压灭菌10 min备用。
A9　动力培养基　　　　
胰酪胨 10.0g　　　　
酵母膏　　　　　　　　　　　 2.5g　　　　
葡萄糖　　　　　　　　　　　 5.0g　　　　
磷酸氢二钠　　　　　　　　　 2.5g　　　　
琼　脂                       3.0g　　　　
蒸馏水　　　　　　　　　　　 稀释至1000mL　　　　pH7.4±0.2　
　将上述各成分于蒸馏水加热溶解并稀释至1000 mL。校正pH后,分装试管,每管2mL。121℃高压灭菌10 min备用。
A10 胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB)　　　　
胰酪胨 15.0g　　　　
植物胨　　　　　　　　　　　 5.0g　　　　
氯化钠　　　　　　　　　　　 5.0g　　　　
琼　脂                       15.0g　　　　
蒸馏水　　　　　　　　　　　稀释至1000mL　　　　pH7.0±0.2　
　将上述各成分于蒸馏水中加热溶解。校正pH后,分装烧瓶,每瓶100mL。121℃高压灭菌15min。水浴中冷至45～50℃加入5mL无菌脱纤维羊血,混匀后倾注平板,每皿18～20mL。　
               附　录 B　试　剂　配　制　(补充件)
B1　Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液　
　在500mL蒸馏水中溶解磷酸二氢钾(KH2PO4) 34.0g,用1mol/L氢氧化钠溶液约175mL校正pH至7.2,再用蒸馏水稀释至1000 mL,制成储存液于冰箱中储存。取原液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000 mL。分装试管,每管90 mL,121℃高压灭菌15 min。
B2　亚硝酸盐试剂　　
a.　 试剂A：对氨基苯磺酸8.0g,溶解于5mol/L,乙酸1000 mL中。　　
b.　 试剂B：α-萘酚2.5g溶解于5mol/L乙酸1000 mL中。
B3　V-P试剂　　
a.　 5％α-萘酚溶液：取α-萘酚5.0g溶解于100 mL无水乙醇中。    
b. 40％氢氧化钾溶液：将氢氧化钾40 g于蒸馏水中溶解并稀释至100 mL。　　
c. 肌氨酸结晶。
B4　碱性复红染色液　　取碱性复红0.5g溶解于20mL乙醇中,再用蒸馏水稀释至100mL,滤纸过滤后储存备用。   
   

 

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