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    出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法——3



    录入时间:2008-12-18 15:08:06 来源:青岛银河澳门官网入口

    附 录 A               
    培 养 基 和 试 剂 (补充件)
    A1 普通肉汤培养基   
    成分:  
    牛肉膏              5.0g  
    氯化钠              5.0g  
    蛋白胨                           20.0g 
    蒸馏水                           1000.0mL   
    制法:将以上成分混合加热溶化,调至pH7.4~7.6,分装试管,121℃高压灭菌30min。
    A2 胰蛋白胨大豆肉汤   
    成分:  
    胰蛋白胨                            17.0g  
    植物蛋白胨             3.0g  
    氯化钠               5.0g  
    磷酸氢二钾(K2HPO4)                  2.5g  
    葡萄糖               2.5g 
    蒸馏水                              1000.0mL   
    制法:将各成分溶于蒸馏水中,必要时加热使完全溶解,分装于试管或玻瓶中,121℃ 高压灭菌15min,最终pH7.3±0.2。  
    注:制备双料胰蛋白胨大豆肉汤时,除蒸馏水外,其他成分加倍,配制10%或20%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤时,可将氯化钠量增加至所需浓度。 
    A3 Baird-Parker培养基   
    成分:  
    胰蛋白胨                              10.0g  
    牛肉膏                5.0g  
    酵母膏                1.0g  
    丙酮酸钠                              10.0g  
    甘氨酸                                12.0g  
    氯化锂(LiCl·6H2O)           5.0g  
    琼脂                                  20.0g  
    蒸馏水                                950.0mL   
    制法:将各成分加于蒸馏水中,加热煮沸使完全溶解,冷至25℃,调至pH7.0±0.2,分装每瓶95mL,121℃高压灭菌15 min,临用时加热溶化琼脂,冷至50℃左右,于每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL,摇匀后倾注平皿培养基,应是致密不透明的,使用前在冰箱贮存不得超过48 h。   
    卵黄亚碲酸盐增菌剂配制:   
    将新鲜鸡蛋浸泡在适当的HgCl2溶液(1:1000)中约1 min,以无菌操作打开鸡蛋,使蛋黄与蛋白分开,将蛋黄加于生理盐水中(3+7,V/V)充分摇匀,于50mL蛋黄乳液中加入10mL过滤除菌的1%亚碲酸钾水溶液,混匀,4±1℃贮存。 
    A4 甲苯胺蓝-DNA琼脂   
    成分:  
    脱氧核糖核酸(DNA)         0.3g  
    琼脂                            10.0g  
    氯化钙(CaCl2无水)        1.1g
    氯化钠                          10.0g  
    甲苯胺蓝(O)            0.083g
    三羟甲基氨基甲烷          6.1g  
    蒸馏水                          1000.0mL  
    制法:将三羟甲基氨基甲烷溶解于蒸馏水中,调至pH9.0,除甲苯胺蓝(O)外将其余各项成分加热使溶解。再将甲苯胺蓝(O)溶于培养基中。分装于塞有橡皮塞的烧瓶中。如立即使用可不需灭菌。已灭菌的培养基在室温可存放4个月无变化,并经数次熔化后仍可使用。 
    A5 生理盐水   成分:                 
    氯化钠              8.5g  
    蒸馏水                           1000.0mL   
    制法:将氯化钠溶于蒸馏水中,分装于适当容器中,121℃高压灭菌15 min。
    A6 凝固酶试验兔血浆  
    临用时取3.8%(取柠檬酸钠3.8 g加蒸馏水100 mL,待溶解后过滤,121℃高压灭菌15min)柠檬酸钠1份,加入新鲜兔血4份,混匀后放冰箱中使用球沉降(或以3000r/min离心30min)后取上清液进行试验。         
       

     

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