4.3酶底物法4.3.1范围本标准规定了用酶底物法测定生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌本法适用于生活饮用水及其水源水中大肠埃希氏菌的检测本法可在24h判断水样中是否含有大肠埃希氏菌及含有的大肠埃希氏菌的最可能数（MPN）值。本法可同时检测总大肠菌群，方法见23。4.3.2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。4.3.2.1大肠埃希氏菌酶底物法即zyme substrate technique for Escherichia coli在选择性培养基上能产生β一半乳糖苷酶分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，并能产生β一葡萄糖醛酸酶分解荧光底物释放出荧光产物，使菌落能够在紫外光下产生特征性荧光；以此技术来检测大肠埃希氏菌的方法为大肠埃希氏菌酶底物法。
4.3.3培养基与试荆培养基与试剂同2.3.3。4.3.4仪器设备4.3.4.1紫外光灯：6W、波长366 nm的紫外灯，用于观测荧光反应4.3.4.2其他仪器同2.3.4。4.3.5检验步骤检验步骤同2.3.54.3.6结果观察与报告4.3.6.1结果判读结果判读同2.3.6.1，对照表同表4与表5。水样变黄色同时有蓝色荧光判断为大肠埃希氏菌阳性，水样未变黄色而有荧光产生不判定为大肠埃希氏菌阳性4.3.6.2定性反应将经过2或I，培养颜色变成黄色的水样在暗处用波长为366 nm的紫外光灯照射，如果有蓝色荧光产生判断为阳睦反应，表示水中含有大肠埃希氏菌。水样未产生蓝色荧光判断为阴性反应。结果以大肠埃希氏菌检出或未检出报告。4.3.6.3 10管法4.3.6.3.1将培养2连h颜色变成黄色的水样的试管在暗处用波长为366 nm的紫外光灯照射，如果有蓝色荧光产生则表示有大肠埃希氏菌存在4.3.6.3.2计算有荧光反应的试管数，对照表4查出其代表的大肠埃希氏菌最可能数。结果以MPN/100ml表示。如所有管未产生荧光，则可报告为大肠埃希氏菌未检出。4.3.6.4 51孔定量盘法4.3.6.4.1将培养24h颜色变成黄色的水样的定量盘在暗处用波长为366nm的紫外光灯照射，如果有蓝色的荧光产生则表示该定量盘孔穴中含有大肠埃希氏菌。4.3.6.4.2计算有荧光反应的孔穴数，对照表5查出其代表的大肠埃希氏菌最可能数。结果以MPN 100 ml表示。如所有孔未产生荧光，则可报告为大肠埃希氏菌未检出。   
   

 

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