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中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数



录入时间:2008-12-12 9:52:10 来源:青岛银河澳门官网入口

1  主题内容与适用范围  
     本标准规定了各类粮食、食品和饮料霉菌和酵母菌计数的检验方法。  
     本标准适用于各类粮食、食品和饮料中霉菌和酵母菌的计数。  
2  引用标准  
    GB 4789.28  食品卫生微生物学检验  染色法、培养基和试剂  
3  设备和材料  
3.1  温箱:25~28℃。  
3.2  振荡器。  
3.3  平天。  
3.4  显微镜。  
3.5  玻塞三角瓶:300 mL。  
3.6  试管:15 mm×150 mm。  
3.7  平皿:直径9 cm。  
3.8  吸管:1 mL及 10 mL。  
3.9  酒精灯。  
3.10  载物玻片。  
3.11  盖玻片。  
3.12  广口瓶。  
3.13  牛皮纸袋:121℃灭菌20 min。  
3.14  金属勺、刀等。  
3.15  试管架。  
3.16  接种针。  
3.17  橡皮乳头。  
4  培养基和试剂  
4.1  马铃薯-葡萄糖琼脂培养基,附加抗菌素,按GB 4789.28 中4.79 规定。  
4.2  孟加拉红培养基:按GB 4789.28 中4.81 规定。  
4.3  高盐察氏培养基:按GB 4789.28 中4.78 规定。  
4.4  灭菌蒸馏水。  
4.5  乙醇。  
5  检验程序  
检验程序如下:     
6  操作步骤  
6.1  采样:取样时须特别注意样品的代表性和避免采样时的污染。首先准备好 
灭菌容器和采样工具,如灭菌牛皮纸袋或广口瓶,金属刀或勺等。在卫生学调查 
基础上,采取有代表性的样品。样品采集后应尽快检验,否则应将样品放在低温 
干燥处。  
    粮食(包括粮库贮粮,粮店或家庭小量存粮)样品的采集,可根据粮囤或粮 
垛的大小和类型,分层定点取样,一般可分三层五点,或分层随机采取不同点的 
样品,充分混合后,取500 g左右送检。小量存粮可使用金属小勺采取上、中、 
下各部位的混合样品。  
    海运进口粮的采样:每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品,每层 
从五点取样混合,如船仓盛粮超过 10000 t,则应加采一个样品。必要时采取有 
疑问的样品送检。  
    谷物加工制品(包括熟饭、糕点、面包等)、发酵食品、乳及乳制品以及其 
他液体食品,用灭菌工具采集可疑霉变食品 250 g,装入灭菌容器内送检。  
6.2  以无菌操作称取检样 25 g(或 25 mL),放入含有225 mL灭菌水的玻塞三 
角瓶中,振摇 30 min,即为 1:10 稀释液。  
6.3  用灭菌吸管吸取1:10稀释液 10 mL,注入试管中,另用带橡皮乳头的1 mL 
灭菌吸管反复吹吸 50 次,使霉菌孢子充分散开。  
6.4  取1 mL1:10稀释液注入含有 9 mL灭菌水的试管中,另换一支 1 mL灭菌 
吸管吹吸 5 次,此液为 1:100 稀释液。  
6.5  按上述操作顺序做10倍递增稀释液,再稀释一次,换用一支1 mL灭菌吸 
管,根据对样品污染情况的估计,选择 3 个合适的稀释度,分别在做 10 倍稀释 
的同时,吸取 1 mL 稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做 2 个平皿,然后将凉至 
45℃左右的培养基注入平皿中,待琼脂凝固后,倒置于 25~28℃温箱中,3 d 
后开始观察,共培养观察 5 d。  
6.6  计算方法:通常选择菌落数在10~150之间的平皿进行计数,同稀释度的 
2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数,即为每克 (或毫升)检样中所含霉菌和酵 
母数。  
6.7  报告:每克(或毫升)食品所含霉菌和酵母数以个/g(个/mL)表示。    

 

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