银河澳门官网入口,银河集团网址登录



银河澳门官网入口,银河集团网址登录

中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服热线:400-0532-596
微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->微生物检测方法和标准->中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验

中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验



录入时间:2008-12-12 9:19:21 来源:青岛银河澳门官网入口

1  主题内容与适用范围  
     本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法。  
     本标准适用于食品和食物中毒样品中溶血性链球的检验。  
2  引用标准  
    GB  4789.28 食品卫生微生物学检验  染色法、培养基和试剂  
3  设备和材料  
3.1  温箱:36±1℃。  
3.2  水浴:36±1℃。  
3.3  显微镜。  
3.4  离心机。  
3.5  试管架。  
3.6  灭菌平皿。  
3.7  灭菌小试管。  
3.8  载玻片。  
3.9  灭菌吸管:1 mL、10 mL。  
3.10  灭菌镊子。  
3.11  均质器。  
3.12  酒精灯。  
3.13  接种环。  
4  培养基和试剂  
4.1  葡萄糖肉浸液肉汤:按GB 4789.28 中4.1 规定,在肉浸液肉汤内加入1%葡萄糖。  
4.2  肉浸液肉汤:按GB 4789.28 中4.1 规定。  
4.3  匹克氏肉汤:按GB 4789.28 中4.62 规定。  
4.4  血琼脂平板:按GB 4789.28 中4.6 规定。  
4.5  人血浆。  
4.6  0.25%氯化钙。  
4.7  灭菌生理盐水。  
4.8  杆菌肽药敏纸片(含 0.04 单位)。  
5  检验程序 
6  操作步骤  
6.1  样品处理  
    称取 25 g 固体检样;称取25 mL 液体检样,加入 225 mL 灭菌生理盐水, 
研成匀浆制成混悬液。  
6.2  一般培养  
    将上述混悬液吸取 5 mL,接种于 50 mL 葡萄糖肉浸液肉汤;或直接划线接 
种于血平板,如检样污染严重,可同时按上述量接种匹克氏肉汤,经 36±1℃培 
养 24 h,挑起乙型溶血圆形突起的细小菌落,在血平板上分纯,然后观察溶血 
情况及革兰氏染色,并进行链激酶试验及杆菌肽敏感试验。  
6.3  形态与染色  
    本菌呈球形或卵圆形,直径 0.5~1 μm,链状排列,链长短不一,短者4~8 
个细胞组成,长者 20~30 个,链的长短常与细菌的种类及生长环境有关;液体 
培养中易呈长链;在固体培养基中常呈短链,不形成芽孢,无鞭毛,不能运动。  
6.4  培养特性  
    该菌营养要求较高,在普通培养基上生长不良,在加有血液、血清培养基中 
生长较好。溶血性链球菌在血清肉汤中生长时管底呈絮状或颗粒状沉淀。血平板 
上菌落为灰白色,半透明或不透明,表面光滑,有乳光,直径约0.5~0.75 mm, 
为圆形突起的细小菌落,乙型溶血链球菌周围有2~4 mm 界限分明、无色透明的 
溶血圈。  
6.5  链激酶试验  
     致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即溶纤维蛋白酶),此酶能激活正 
常人体血液中的血浆蛋白酶原,使成血浆蛋白酶,而后溶解纤维蛋白。  
     吸取草酸钾血浆0.2 mL,加 0.8 mL 灭菌生理盐水,混匀,再加入 18~24 h36 
±1℃培养的链球菌培养物0.5 mL 及 0.25%氯化钙0.25 mL(如氯化钙已潮解, 
可适当加大至 0.3%~0.35%),振荡摇匀,置于 36±1℃水浴中 10 min,血浆混 
合物自行凝固(凝固程序至试管倒置,内容物不流动)。然后观察凝块重新完全 
溶解的时间,完全溶解为阳性,如 24 h 后不溶解即为阴性。  
    草酸钾人血浆配制:草酸钾 0.01 g放入灭菌小试管中,再加入 5 mL人血, 
混匀,经离心沉淀,吸取上清液即为草酸钾人血浆。  
6.6  杆菌肽敏感试验  
    挑取乙型溶血性链球菌液,涂布于血平板上,用灭菌镊子夹取每片含有 0.04 
单位的杆菌肽纸片,放于上述平板上,于 36±1℃培养 18~24 h,如有抑菌带出 
现即为阳性。同时用已知阳性菌株作为对照。   
   

 

上一篇:动物病原微生物菌(毒)种保藏管理办法

下一篇:中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验

首页 | 关于我们 | 网上商城 | 在线客服 | shchuhu.com
业务联系电话
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
邮箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青岛市城阳区锦汇路1号A2栋
产品技术咨询
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它时段:13105190021
投诉与建议:13105190021 13006536294