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白喉棒状杆菌毒力实验



录入时间:2008-12-2 16:34:56 来源:青岛银河澳门官网入口

   由于只有带β-棒状杆菌噬菌体的白喉棒状杆菌才产生外毒素。因此,判断从标本中分离出的白喉棒状杆菌是否具有致病性,必须做毒力实验,其方法有下列两种。 
琼脂平板毒力实验(Elek平板毒力实验) 
    将含白喉抗毒素的滤纸条贴于Elek平板上,再在培养液上与滤纸条垂直划线接种白喉棒状杆菌,如为产毒株,则白喉棒状杆菌产生的毒素(抗原)与白喉抗毒素在比例适当处结合,产生免疫沉淀反应,生成乳白色沉淀线。                 
【材料】 
1、白喉棒状杆菌标准产毒株及类白喉杆菌吕氏血清斜面24时培养物。 
2、待测菌株。 
3、Elek培养液。 
4、白喉抗毒素(500U/ml)、无菌兔血清或猪血清、灭菌滤纸条(75mm*5mm)。 
【操作】 
1、取Elek培养液15ml,加热融化,待冷至50—55℃时,加入3ml无菌兔血清或猪血清,立即混匀,倾入无菌平皿中。 
2、待琼脂凝固后,将浸有白喉抗毒素(500U/ml)的滤纸条(75mm*5mm)放于平板中央,将平板置37℃温箱中1—2小时,以使培养液表面干燥 。 
3、将待测细菌分别与滤纸条成垂直方向作划线接种。测定未知标本时应同时用阳性(白喉棒状杆菌)及阴性(类白喉杆菌)作对照。 
4、将平板置37℃温箱培养18—24h小时后观察结果,观察在接种线与滤纸间有无可见的乳白色沉淀线。    
   

 

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