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动物接种方法



录入时间:2008-11-19 16:49:00 来源:青岛银河澳门官网入口

      病毒学常见的动物接种法有脑内接种、鼻内接种、乳鼠接种、静脉接种、腹腔接种、皮下接种和角膜接种等。较常用的为前三项接种法。
1、脑内接种 
   家兔和豚鼠脑内接种,先在顶部剪毛消毒。一般用乙醚麻醉后进行。接种部位选在颅前后中线旁约5mm的平行线与动物瞳孔横线交叉处。以碘酊、酒精消毒后,用手将皮肤固定,用锥子刺穿颅骨,拔锥时皮肤不要动,用4号针头刺入。进针深度4—10mm。注射量为0.1—0.25mm(要将4号针头针尖磨掉)。 
    小白鼠和地鼠不需麻醉,用左手拇指与食指固定鼠头,在眼后角与对侧耳前缘耳根所构成的交叉线交点两侧稍偏一点部位进针。注射量为0.03—0.05mm,乳鼠为0.01—0.02mm 
    猴用巴比妥麻醉后,背部朝上将动物头部固定,在耳上部距颅前后中线6mm处钻孔,垂直将针头全部刺入。抽取无脑脊液出现时缓慢注入标本,接种量为0.10.25mm。 
2、鼻内接种 
   先将动物麻醉,大动物用麻醉口罩,小动物放入装有乙醚棉球的玻璃缸内。麻醉后用左手食指及中指夹其后颈,拇指顶其下颚,右手将标本滴入鼻内。接种量小白鼠为0.03—0.05ml;大白鼠为0.05—0.1ml;豚鼠和家兔可达2ml。 
   注射器不可触及动物,防止滴入口腔及吸入肺内,以免引起肺水肿而死亡。 
3、乳鼠接种 
   选用同一窝乳 鼠在出生后24h内接种,用其中的两只剪去尾尖作正常对照。用竹镊轻镊乳 鼠,从颈背部沿囟门刺入脑内,接种量为0.02ml。注毕轻退针头,避免注射液由注射孔流出。并用母鼠窝内棉花轻擦其皮肤后,放回母鼠处。 
   注射接种后逐日观察,注意正常对照和实验接种组的比较。如出现症状立即取出, 
   用酒精作表面消毒,除去四肢、头、尾、内脏,剥去皮肤,剩肌 肉和骨骼,也可取脑组织和心脏,用Hanks液研制成200g/l的悬液,加双抗液(青霉素100U/ml,链霉素100tzg/ml) 置4℃下4h,取出后3000r/min离心30min,去沉渣,吸上清做试验,同时吸少许上清作无菌试验。其余低温保存备用。 
如果注射后不发病,一般观察两周后进行处理,也可再延长观察时间。捕杀发病的乳鼠按上法研制成悬液,对接种细胞进行病毒分离。    
   
   

 

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