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    改良牛津琼脂培养基的原理和使用方法

    刘浩然
    录入时间:2024-12-16 10:18:04 来源:青岛银河澳门官网入口

    一、试验原理及用途

      用于单增李斯特氏菌的选择分离培养。

      哥伦比亚琼脂基础提供氮源和生长因子等营养物质,内含琼脂为凝固剂;细菌分解七叶苷产生七叶素,七叶素与铁离子结合生成黑色物质,形成黑色菌落;柠檬酸铁铵可提供铁元素;氯化锂维持渗透压;粘菌素、拉氧头孢为抑菌剂。


    二、培养基配方(g/L)

    哥伦比亚琼脂基础

    42.5

    七叶苷

    1.0

    柠檬酸铁铵

    0.5

    氯化锂

    15.0

    粘菌素

    0.01

    pH值7.2±0.2(25℃)


    三、试验方法

      1、称取本品59.01g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌10分钟,冷至46℃时,加入2mL过滤除菌的1%拉氧头孢溶液,混匀,倾入无菌平皿,备用。

      2、接种质控菌株,涂布接种至培养基,胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA,货号:HB0177-8)作为参比培养基。

      3、放置35℃±1℃需氧培养24h-48h。


    四、质控结果

      接种以下质控菌株,放置35℃±1℃需氧培养24h-48h。如图1所示。

    质控菌株

    菌株编号

    接种量(CFU)

    回收率

    生长情况

    其它特征

    单增李斯特氏菌

    ATCC 19114

    10-100

    ≥70%

    +++

    黑色菌落,有黑色环

    英诺克李斯特氏菌

    ATCC 33090

    10-100

    ≥70%

    +++

    黑色菌落,有黑色环

    大肠埃希氏菌

    ATCC 25922

    100-1000

    /

    -

    抑制

    金黄色葡萄球菌

    ATCC 25923

    100-1000

    /

    -

    抑制

    图1 改良牛津琼脂培养基的原理和使用方法


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