一、培养基的用途及原理
用于食品和水中肠球菌鉴别培养。
胰蛋白胨和酵母浸粉、牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆盐和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌。
二、成分(g/L)
胰蛋白胨 |
17.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
牛胆粉 |
10.0 |
氯化钠 |
5.0 |
柠檬酸钠 |
1.0 |
七叶苷 |
1.0 |
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
叠氮化钠 |
0.25 |
pH 7.1±0.2 |
25℃ |
三、试验方法:
1. 制备工作菌悬液。
2.在无菌环境中打开即用型试管,向试管中接种目标菌种稀释液10-100CFU/管;非目标菌种稀释液1000-5000CFU/管。
3.将接种完菌液的试管放置在36±1℃,需氧条件下培养24小时,记录实验结果。
四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,在36±1℃需氧培养24小时,记录实验结果。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量/CFU |
质控结果 |
生长现象 |
粪肠球菌 |
ATCC29212 |
10-100 |
生长良好 |
培养基变黑,荧光消失 |
屎肠球菌 |
ATCC27270 |
10-100 |
生长良好 |
培养基变黑,荧光消失 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
>5000 |
抑制 |
/ |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
>5000 |
抑制 |
/ |
图1 单料肠球菌肉汤培养基微生物质控结果
五、方法的局限性:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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