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一、培养基的用途及原理
用于药品中洋葱伯克霍尔德菌群的选择性培养。
胰蛋白胨、酵母提取物提供细菌生长的基本营养，氯化钠维持渗透压，丙酮酸钠可刺激洋葱伯克霍尔德菌群的生长，磷酸二氢钾为缓冲剂，琼脂为凝固剂，酚红为酸碱指示剂。稍偏酸的pH使培养基呈现为黄色，培养基中含少量的蔗糖有助于洋葱伯克霍尔德菌群的生长，由于产酸不多且易被氧化成碱性物质，同时洋葱伯克霍尔德菌群产碱能力较强，生长时会导致培养基的pH逐渐升高，培养基的颜色由黄色逐渐变为红色，因此洋葱伯克霍尔德菌群在此培养基上菌落通常偏红色，菌落周围培养基变红。培养基中添加的庆大霉素、万古霉素、多粘菌素对多数革兰氏阴阳性菌都有较强的抑菌效果。
二、成分（g/L）
|
胰蛋白胨 |
10.0 |
|
蔗糖 |
2.0 |
|
酵母提取物 |
1.5 |
|
结晶紫 |
0.001 |
|
丙酮酸钠 |
7.0 |
|
磷酸二氢钾 |
1.54 |
|
氯化钠 |
5.0 |
|
酚红 |
0.02 |
|
琼脂 |
14.0 |
|
庆大霉素 |
0.01 |
|
万古霉素 |
0.0025 |
|
多粘菌素B |
600000U |
|
pH |
6.2±0.2 |
三、配制方法
称取本品41.06g，加热煮沸完全溶解于1000ml纯化水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，冷却至45℃~50℃时，每200ml培养基中加入1支BCCSA抑菌剂(含庆大霉素2mg,万古霉素0.5mg,多粘菌素B120000U)，混合均匀，倾入无菌平皿，备用。
四、生长现象及结果观察
接种以下菌株至BCCSA培养基平板，30-35℃需氧培养48-72h。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量/CFU |
生长现象 |
|
洋葱伯克霍尔德氏菌 |
CMCC23005 |
10-100 |
培养基变红 |
|
新洋葱伯克霍尔德菌 |
CMCC23006 |
10-100 |
培养基变红 |
|
神秘伯克霍尔德菌 |
CMCC23010 |
10-100 |
培养基变红 |
|
金黄色葡萄球菌 |
CMCC26003 |
100-1000 |
抑制 |
|
铜绿假单胞菌 |
CMCC10104 |
100-1000 |
抑制 |
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