【原理】

  醋酸纤维膜是由醋酸纤维素制成的均一薄膜，对分子移动无阻力,是免疫球蛋白鉴定的一种简单快速的电泳方法。血清蛋白在一定的pH下都带有电荷,由于各种蛋白质的等电点及分子量的不同,所带的电荷也就各不相同,在直流电场的作用下,它们在醋酸纤维膜上泳动的速度也不一样,经过一段时间泳动后,即可彼此分开,形成电泳图谱。

(一)巴比妥缓冲液(pH8.6,离子强度(μ)0.05)

【成分】

5.5二乙基巴比妥钠	10.3g
5.5二乙基巴比妥酸	1.84g
蒸馏水	1000ml

【制法】

  将以上两种成分加入蒸馏水中,加热溶解即可，

【用途】

  蛋白电泳用。

(二)染色液

1.0.05%氨基黑染液

【成分】

氨基黑10B	0.5g
1mol 醋酸	500ml
0.1mol 酸酷钠	500ml

【制法】

  先将醋酸和醋酸钠溶液混匀后,再加入氨基黑粉剂,待充分混匀溶解后,即可使用。

2.0.25%氨基黑染液

【成分】

氨基黑10B	1.0g
甲醇	200ml
冰醋酸	40ml
蒸馏水	160ml

【制法】

  先将后3种成分混匀,然后再加入氨基黑混匀溶解后,即可使用。

【用途】

  用于经电泳后之醋酸纤维膜标本的染色。

(三)5%醋酸脱色液

【成分】

甲醇	90ml
醋酸	10ml
蒸馏水	100ml

【制法】

  把以上3种成分混合摇匀后,即可使用。

【用途】

  用于经染色后之醋酸纤维膜电泳标本的脱色。

(四)透明液

【成分】

95%乙醇	7份
冰醋酸	3份

【制法】

  将以上两种成分混匀后,即可使用。

【用途】

  用于“染过色的醋酸纤维膜电泳标本”的透明。

(五)蛋白洗脱液

【成分】

1N 氢氧化钠	500ml
0.1N EDTA	50ml
蒸馏水	500ml

【制法】

  将以上3种成分混匀后即可使用。

【用途】

  用于洗脱醋酸纤维膜的蛋白带。

  注:此液用于洗脱氨基黑染色的蛋白带,而丽春红R或S染的蛋白带则用0.4NNaOH 溶液。

(第二军医大学蔡燕刚、吴挹芳编 吴挹芳审)

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