一、产品用途及原理

  用途：用于培养猪支原体的基础培养基。

  原理：PPLO肉汤、脑心浸液、酵母浸粉提供氮源，维生素，氨基酸和生长因子；猪血清提供甾醇、脂质类并补充氨基酸；Hank's平衡盐维持培养基渗透压和pH值；苯酚红为染料；抑菌剂抑制杂菌生长。

二、培养基配方（g/1300mL）

三、试验方法

  1、称取本品26.4g，加热溶解于1300mL蒸馏水中，121℃高压灭菌15min，冷却至室温，无菌操作加入433mL猪血清和1支抑菌剂（含杆菌肽0.25g、青霉素0.25g）并调节pH至7.7±0.1（25℃），混匀，分装，备用。

  2、制备质控菌株，接种至培养基中，做10倍系列稀释，稀释至10-9，并做空白对照。

  3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中，微需氧培养7d-21d。

四、质控结果

  接种以下质控菌株，放置于36℃±1℃恒温培养箱中，微需氧培养7d-21d。猪肺炎支原体培养至12d的试验结果如图1所示。

质控菌株	菌株编号	方法	质控结果	其它特征
猪肺炎支原体	/	定量	生长良好	10-9稀释度管变黄

图1 猪支原体培养基培养猪肺炎支原体12d时的试验结果

五、试验注意事项  

  1、若使用非一次性试管等容器进行试验，容器使用前应使用蒸馏水冲洗干净，确保无洗涤液等残留物，以免增加试验的不确定性或污染。

  2、灭菌结束后，试管口会有水珠，在进行梯度稀释时，水珠很容易与空气中的细菌接触以致污染，因此，试管口应灼烧至干燥，胶塞也需过火，振荡操作后，若培养基接触到胶塞，还需再次进行灼烧操作。

  3、调节pH时，使用的酸碱试剂需是无菌的。

  4、支原体培养前应使用封口膜封口，可提供微需氧环境以及降低污染的风险。

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