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基因工程中的工具酶



录入时间:2024-8-1 16:34:25 来源:青岛银河澳门官网入口

工具酶从20世纪40年代至60年代,从理论上已经指出了基因体外重组的可能性,但科学家们面对庞大的双链DNA分子束手无策,无法根据需要将DNA分子切割成单个的基因片段,也无法将两个DNA片段正确地连接起来。限制性核酸内切酶的发现解决了DNA分子的切割问题,1970年,SmithWilcox从流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)中分离并纯化了限制性核酸内切酶Hind Ⅱ;1972年,Boyer实验室发现了Eco R I核酸内切酶,能够识别核苷酸链上的GAATTC序列;从此以后,相继发现了各种类似于Eco R I的限制性核酸内切酶,它们可以在特殊的位点切割DNA分子,因此,有人将限制性核酸内切酶形象地称为长眼睛的剪刀”。

几乎与此同时的另一项重要发现是DNA连接酶。1967年,世界上有5个实验室几乎同时发现了DNA连接酶。这种酶能够将DNA的裂口修复,将两条DNA片段按预定的方向重新连接在一起。1970年,美国Khorana实验室发现了具有更高连接活性的T4 DNA连接酶。可以毫不夸张地说DNA连接酶就是重组DNA缝纫针和线。

 

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