一、产品用途及原理:
该培养基用于洋葱伯克霍尔氏菌的分离培养。
酪蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;乳糖和蔗糖为可发酵的糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;酚红为酸碱指示剂;结晶紫可抑制革兰氏阳性菌的生长;琼脂为培养基的凝固剂。庆大霉素为广谱抗生素,对多数假单胞菌属、变形杆菌属、大肠菌群、葡萄球菌属、需氧芽孢杆菌属等多种革兰氏阴阳性菌有较强的抗菌活性;万古霉素可抑制细菌细胞壁的合成,对金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌等作用强,对艰难梭菌、炭疽杆菌、白喉杆菌等作用也良好;多粘菌素B对绿脓杆菌、大肠杆菌、克雷伯氏菌及嗜血杆菌等多种革兰氏阴性菌有抑制作用。
二、培养基配方(g/L):
Casein Peptone/酪蛋白胨 |
10.0 |
Lactose/乳糖 |
10.0 |
Sucrose/蔗糖 |
10.0 |
Sodium Chiloride/氯化钠 |
5.0 |
Yeast Extract/酵母浸粉 |
1.5 |
Phenol Red/酚红 |
0.08 |
Crystal Violet/结晶紫 |
0.002 |
Agar/琼脂 |
14.0 |
pH值6.8±0.3(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品50.58g,加热煮沸完全溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200mL,121℃高压灭菌15分钟。冷却至45℃-50℃时,每200mL培养基中加入1支庆大霉素Gentamicin添加剂(2mg)、1支万古霉素Vancomycin添加剂(0.5mg)和1支多粘菌素B Polymyxin B添加剂(120000U),混匀,倾入无菌平皿备用。
2. 将质控菌株划线接种于培养基平板上。
3. 放置于恒温培养箱36℃需氧培养18-24小时,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于36℃需氧培养18-24小时,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
洋葱伯克霍尔德氏菌 |
ATCC 25416 |
定性 |
生长良好 |
无色菌落,周围培养基变红 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
定性 |
/ |
抑制 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
定性 |
/ |
抑制 |
铜绿假单胞菌 |
ATCC 27853 |
定性 |
/ |
抑制 |
图1 洋葱伯克霍尔氏菌鉴定培养基微生物质控结果
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