一、氢氧化细菌和铁载体的简介：
氢氧化细菌（Hydrogen-oxidizing bacteria）是一类能通过氧化氢气获得能量，固定二氧化碳作为唯一碳源的微生物，土壤中分布广泛，尤其是豆科植物根际大量存在。氢氧化细菌没有单独的分类，多分布在假单胞菌属、副球菌属、黄杆菌属、分支杆菌属、产碱菌属、诺卡氏菌属、醋酸杆菌属及棒杆菌属等。绝大部分氢氧化细菌是兼性化能自养型，它们可以自养生长、异养生长、甚至混合营养生长，好氧或兼性厌氧。氢氧化细菌属于植物根际促生菌，在农作物增产方面有巨大的应用潜力，所以其各种促生机制的研究已成为热点，其中分泌铁载体就是几种重要的促生机制之一。
铁载体（siderophore）是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质。铁元素是微生物生长的必需元素，在缺铁的环境中微生物会分泌铁载体螯合铁离子满足自身生长需要。目前，常用的铁载体检测方法为Schwyn和Neilands发明的通用CAS琼脂平板法，当细菌产生的铁载体与由铬天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化铵（HDTMA）、铁离子组成的蓝色复合物结合后，会夺走铁离子，使细菌周围的培养基颜色由蓝色变为橘黄色，出现铁载体分泌圈，有利于判断细菌是否产生铁载体。
二、CAS检测培养基
1. 产品用途：用于细菌铁载体筛选试验。
2. 配方（mg/L）：
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铬天青S（CAS） |
60.5 |
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十六烷基三甲基溴化铵（HDTMA） |
72.9 |
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六水氯化铁 |
2.645 |
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二水磷酸二氢钠 |
295.25 |
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十二水磷酸氢二钠 |
1213.5 |
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氯化铵 |
125 |
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磷酸二氢钾 |
37.5 |
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氯化钠 |
62.5 |
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琼脂 |
9000 |
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pH值6.8±0.1（25℃） |
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三、试验方法：
1. 称取本品10.87g，加热煮沸完全溶解于1000mL蒸馏水中，分装三角瓶，116℃高压灭菌30分钟，冷却至50℃时，倾入无菌平皿，备用；
2. 用接种环挑取质控菌株新鲜培养物点种到平板上；
3. 放置35℃需氧培养24小时，记录试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置于35℃需氧培养24小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
参比或计数培养基 |
质控结果 |
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铜绿假单胞菌 |
ATCC 9027 |
/ |
/ |
菌落周围有黄色环 |
图1 铜绿假单胞菌ATCC 9027在CAS检测培养基菌落特征
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