【原理】
DH淋菌培养基是根据淋球菌的生长繁殖需要丰富的碳源、氮源、促生长因子及为克服该菌易受pH、毒性代谢产物等因素的影响而设计的,故培养基中除有营养丰富的DH基础液促进细菌生长外,还添加能恒定pH的磷酸盐与降低毒性代谢产物于最低限度的可溶性淀粉。
【成分】
胰蛋白胨(Oxoid)
3g
氯化钠
1.0g
磷酸二氢钾
0.2g
磷酸氢二钾
0.8g
可溶性淀粉
0.3g
DH(地龙黄芪)基础液
20ml
营养琼脂(上海医化所)
9g
蒸馏水
加至200ml
【制法】
1.将上述成分(营养琼脂除外),依次溶于蒸水中,加热融化后,调整至pH7.2~7.4。再加入营养琼脂,混匀,115℃灭菌15分钟,待冷至50℃时加入经蒸馏水溶血(血:水=1:1)之无菌蒸馏水绵羊血30ml,摇匀后倒于无菌平皿中,冷却凝固后,于4℃贮存备用。
2.DH基础液:称取干地龙35g,用自来水浸泡30分钟,洗去泥沙,剪碎后置三角烧瓶内,加入黄芪3.5g、当归1g及蒸馏水500ml,煮沸30分钟,加氯化钠2.5g,冷后调至pH1.5~2.0,然后加入胃蛋酶0.2g,混匀,37℃消化3~4小时,用三层纱布过滤,滤液用蒸馏水补足至500ml,再用NaOH调至pH8~8.2,121℃灭菌20分钟,分装成小瓶,4℃保存备用。
【用途】
该培养基含有丰富的碳源、氮源、血色素、维生素等促生长因子,可用于咽、阴道、尿道、子宫颈及直肠中淋球菌及脑膜炎球菌的分离培养与药敏试验。
【注意事项】
1.蒸馏水溶解羊血(脐胎血更好),释放出来的血色素即可代替国外进口培养基中的血色素粉。
2.DH基础液中含有大量的氨基酸、蔗糖、脂类、叶酸及维生素等,与胰蛋白胨、血色素一起组成良好的淋球菌促生长因子。
3.一定量的抗生素,虽可抑制杂菌生长,但淋球菌亦受到明显抑制,本培养基中虽未加抗生素,但只要把培养标本按区划开培养,淋球菌的检出率比加抗生素更好。
(济南军区第一五二医院检验科 龚志术供稿)
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