1.方法一(纸条法)
(1)培养基
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蛋白胨 |
10g |
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NaCl |
5g |
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牛肉膏 |
10g |
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半胱氨酸 |
0.5g |
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蒸馏水 |
1000ml |
pH 7.0～7.4.分装试管，每管液层高度4～5 cm,112℃灭菌20～30 min。另外将普通滤纸剪成0.5～1cm宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用5%～10％的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。
（2）接种与观察：用新鲜斜面培养物接种培养基。接种后，用无菌摄子夹取一条醋酸铅纸条用棉塞塞紧，使悬挂于管中，下端接近培养基表面，不接触液面，适温培养。于接种后3,7,14天观察。纸条变黑色者为阳性，不变者为阴性。
（3）注意事项：①此方法比较敏感，本培养基不适用于肠杆菌科。 ②纸条高度应放置适当，离液面太远影响灵敏度，太近容易溅湿。同时移动试管架时也要平稳。③除空白对照外，应放阴性对照。
2.方法二（肠杆菌）
（1）培养基
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牛肉膏 |
7.5g |
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蛋白胨 |
10g |
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NaCl |
5g |
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明胶 |
100-120g（或琼脂15g） |
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10%FeCl2（培养基灭菌后无菌加入） |
5ml |
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蒸馏水 |
1000ml |
pH 7.0,112℃灭菌20 min。
在明胶培养基尚未凝固时，加入新制备的过滤灭菌的FeCl2,用无菌试管分装，培养基高度约为4-5 cm,立即置冷水冷却凝固。
（2）接种与观察：用穿刺法接种，30℃培养，1,3,7天，观察，变黑者为阳性，不变为阴性。
（3）注意事项：①此方法适于肠杆菌科细菌的鉴定。②在我们实验室中用的是硫酸亚铁代替氯化亚铁。③可同时测定明胶液化，20℃培养。
本文节选自《常见细菌系统鉴定手册》第十四章。
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